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齊口裂腹魚源致病性愛德華菌的鑒定及致病性研究

摘要

2012年和2013年的8月至10月間,四川省雅安市暴發(fā)齊口裂腹魚急性敗血癥,從患病齊口裂腹魚內(nèi)臟器官和腹水分離到2株病原菌(Et-1和Et-2),其感染的臨床特點主要為腹部膨大,腹腔內(nèi)充滯含血腹水,體表和鰭條基部有大量出血斑,甚至潰瘍和膿腫,肝、腎、脾腫大.根據(jù)分離菌株的形態(tài)特征與理化特性等表型生物學(xué)特性,初步判定其為遲鈍愛德華菌.為研究該病原,進(jìn)行了16S rDNA、gyrB基因序列測定與系統(tǒng)發(fā)育分析,并對其毒力基因fimA和gadB進(jìn)行了雙重PCR鑒定和2個毒力基因的系統(tǒng)發(fā)育分析,結(jié)果顯示,2分離株與GenBank中E.tarda 16S rDNA、gyrB基因、fimA基因和gadB基因的序列同源性均達(dá)99%以上,且在MEGA 4.0構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹上與E.tarda聚為一族,雙重PCR擴(kuò)增出441bp和582bp兩條特異性條帶,進(jìn)而確認(rèn)2分離株為致病性E.tarda。其感染齊口裂腹魚病理組織損傷主要為骨骼肌壞死,肝脂肪變性,腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤,腎小管上皮細(xì)胞透明滴狀變,卡他性一壞死性腸炎,腦組織和鰓水腫,腦神經(jīng)細(xì)胞變性、結(jié)構(gòu)模糊,膠質(zhì)細(xì)胞增生。人工感染健康魚后出現(xiàn)與自然發(fā)病相似癥狀,從發(fā)病魚內(nèi)臟組織再分離的細(xì)菌特性與原感染菌相同。分離菌株對氟苯尼考、左氧氟沙星和強(qiáng)力霉素等10種藥物敏感,對青霉素、吉他霉素和阿莫西林等7種藥物耐受。雖然,E.tarda宿主范圍較廣,但對魚類感染E.tarda的報道多集中于鰻鱺、牙鲆、斑點叉尾鮰、羅非魚等典型溫水性養(yǎng)殖品種,而冷水性魚類感染E.tarda報道較少。本研究首次報道了齊口裂腹魚這一重要冷水性經(jīng)濟(jì)魚類的遲鈍愛德華氏菌病且該病。在雅安地區(qū)齊口裂腹魚養(yǎng)殖業(yè)中,己連續(xù)兩年暴發(fā),有較高的致病性和致死性。該病可能是齊口裂腹魚養(yǎng)殖業(yè)中的重要新病原。

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