1.探索安全高效制備張口呼吸小鼠模型方法。
  2.制備基于快速衰老小鼠(SAMP)的張口呼吸模型,并探究張口呼吸對上氣道組織線粒體...">

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【6h】

快速衰老小鼠張口呼吸模型制備及其線粒體功能損傷研究

 

目錄

聲明

縮略詞表

研究背景

1.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征

2.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征與張口呼吸

3.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征與線粒體功能改變

4.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征的動物模型

第一部分:張口呼吸小鼠模型的制備方法研究

1.研究背景及目的

2.研究方法及技術(shù)

3.實施方案

4.研究意義

5.材料與方法

6.結(jié)果

7.討論

第二部分:基于快速衰老小鼠的張口呼吸模型建立及其各組織線粒體損傷研究

1.研究背景及目的

2.研究方法與技術(shù)

3.實施方案

4.研究意義

5.材料與方法

6.結(jié)果

7.討論

參考文獻(xiàn)

攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及其他科研成果

致謝

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摘要

目的:
  1.探索安全高效制備張口呼吸小鼠模型方法。
  2.制備基于快速衰老小鼠(SAMP)的張口呼吸模型,并探究張口呼吸對上氣道組織線粒體功能損傷的影響。
  方法:
  1.將20只C57BL/6分為縫合組(n=10)與填塞組(n=10),分別行外鼻孔縫合與鼻腔填塞,比較分析外鼻孔縫合與鼻腔填塞兩種造模方法下小鼠死亡率與鼻腔阻塞物脫落率,選擇低死亡率低脫落率的鼻腔阻塞方法用于進(jìn)一步造模研究。
  2.快速衰老小鼠張口呼吸模型線粒體功能損傷研究:將4月齡SAMP6小鼠12只與SAMR1小鼠12只分別行鼻腔阻塞,制備張口呼吸模型(SAMP6_OR和SAMR1_OR)。造模后,各取4只備用于1周后取材。剩余小鼠分別飼養(yǎng)至6月齡(n=4)、8月齡(n=4),取相同數(shù)量同月齡SAMP6小鼠與SAMR1小鼠與之匹配備取材。每只小鼠取皮膚、上氣道肌肉、腹直肌、上氣道黏膜、頦舌肌、臀大肌、白細(xì)胞制備細(xì)胞樣本,加載JC-1并進(jìn)行線粒體膜電位檢測。比較分析4、6、8月齡SAMP6與SAMR1、SAMP6_OR與SAMP6、SAMR1_OR與SAMR1小鼠各組織線粒體膜電位。分析4、6、8月齡SAMP6與SAMR1小鼠各組織線粒體膜電位變化趨勢。
  結(jié)果:
  1.縫合造模法與填塞造模法造模死亡率與鼻腔阻塞物脫落率比較
  1)鼻腔縫合法造模死亡率(70%)顯著高于鼻腔填塞法(0%)(P<0.05)。
  2)縫合組線結(jié)脫落率(50%)與鼻腔填塞組填塞物脫落率(20%)無顯著差異(P>0.05)。
  2.快速衰老小鼠張口呼吸模型線粒體功能損傷研究
  1) SAMP6與SAMR1小鼠相比,全身大部分組織線粒體膜電位顯著降低(P<0.05)。
  2) SAMP6小鼠4、6、8月齡之間皮膚(P<0.05)、上氣道肌肉(P<0.05)、腹直?。≒<0.05)、上氣道黏膜(P<0.05)、頦舌?。≒<0.05)、臀大?。≒<0.05)、白細(xì)胞(P<0.05)線粒體膜電位均存在顯著差異。
  3) SAMR1小鼠4、6、8月齡之間上氣道黏膜(P<0.05)、頦舌肌(P<0.05)、白細(xì)胞(P<0.05)線粒體膜電位之間存在顯著差異。但皮膚(P>0.05)、上氣道肌肉(P>0.05)、腹直?。≒>0.05)、臀大?。≒>0.05)線粒體膜電位無顯著差異。
  4) SAMP6_OR小鼠皮膚、腹直肌、上氣道肌肉與黏膜組織、白細(xì)胞線粒體膜電位顯著低于SAMP6小鼠(P<0.05)。
  5) SAMPR1_OR小鼠上氣道肌肉線粒體膜電位、白細(xì)胞膜電位顯著低于 SAMPR1小鼠(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.使用鼻腔填塞法進(jìn)行張口呼吸小鼠模型造模創(chuàng)傷小,死亡率低,不易脫落,可用于進(jìn)一步造模研究。
  2.快速衰老與自然衰老過程中線粒體功能均隨年齡增長而下降,各組織衰老進(jìn)程存在差異??焖偎ダ闲∈髲埧诤粑P蜕蠚獾兰∪馀c黏膜損傷更為嚴(yán)重,在此基礎(chǔ)上還出現(xiàn)了皮膚、腹直肌、白細(xì)胞線粒體功能損傷,這種損傷存在全身性趨勢。但自然衰老小鼠張口呼吸模型中僅上氣道肌肉、白細(xì)胞損傷較為明顯,是否存在全身性趨勢有待進(jìn)一步研究。

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