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【6h】

馬勃多糖的分離純化與基本結構研究

 

目錄

聲明

綜述

1馬勃研究概況

2生物活性多糖研究概況

參考文獻

摘要

第一部分馬勃多糖的分離與純化

1引言

2材料、試劑與儀器

3方法

4結果與討論

參考文獻

附錄

第二部分馬勃多糖理化性質的研究

1引言

2材料、試劑與儀器

3方法

4結果與討論

參考文獻

附錄

第三部分馬勃多糖基本結構分析

1引言

2材料、試劑與儀器

3方法

4結果與討論

參考文獻

第四部分討論與展望

1討論

2展望

致謝

在讀期間所發(fā)表文章目錄

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摘要

本文以藥用植物馬勃為研究對象,研究其多糖的提取、分離純化、結構以及理化性質,為揭示馬勃多糖的結構與活性的關系,進一步開發(fā)利用此類資源初步奠定了基礎。主要研究內容與結論如下:馬勃經熱水浸提,用Sevage法脫蛋白,乙醇沉淀,得到馬勃粗多糖。粗多糖經DEAE-sepharose fast flow離子交換層析和Sephacryl S-300 HR凝膠層析進一步純化得到三個主要多糖組分:CGP Ⅰ-1,CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ。三種多糖分別經Sephacryl S-300 HR凝膠層析檢測顯示單一對稱峰,瓊脂糖電泳呈現(xiàn)單一斑點,紫外260nm,280nm掃描沒有吸收峰,證明三種多糖為不含蛋白、核酸的均一組分。通過Sephacryl S-300 HR凝膠層析測定CGP Ⅰ-1,CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ的表觀分子質量分別為9.12×10<'4>Dal,18.6×10<'4>Dal,15.6×10<'4>Dal:紙層析和GC-MS分析三種多糖中的單糖組成和摩爾比,研究發(fā)現(xiàn)CGP Ⅰ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩爾比為1.22:11.28:3.92:CGP-Ⅱ含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩爾比為1.74:26.45:0.36,CGP-Ⅲ含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩爾比1.06:9.9:3.29.<'13>CNMR圖譜和咔唑-硫酸法研究均表明CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ中含有糖醛酸,用咔唑-硫酸法測得CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ中的糖醛酸含量分別為17.2%和20.5%。三種多糖的紫外光譜顯示,它們的最大紫外吸收峰具有隨糖濃度的降低向低波長漂移的現(xiàn)象。紅外光譜顯示,在1420 cm<'-1>,2920 cm<'-1>,3400 cm<'-1>左右均具有多糖的特征吸收峰。三種多糖均為吡喃糖,通過對核磁共振圖譜的解析進一步證實的CGP I-1為多不含糖醛酸的中性多糖,同時具有α、β兩種鍵型。而CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ則以β型差向異構為主,由高碘酸氧化和Smith降解得知CGP Ⅰ-1中存在大量的1→6、1→鍵型,且與1→4/1→4,6鍵的摩爾比為7.8:5.5,CGP-Ⅱ中1→6,1→,和1→4/1→4,6鍵,摩爾比為7.4:7.9。CGP-Ⅲ中其摩爾比為8.4:9.3。三種多糖主鏈中都存在不被高碘酸氧化的Glc(1→3)鍵型。通過原子力顯微鏡對CGP Ⅰ-1的分子形貌觀察,發(fā)現(xiàn)其為高度分支結構,高濃度時易形成強大的網(wǎng)絡結構。

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