胎兒前列腺組織發(fā)育中PCA3基因表達(dá)和裸鼠皮下前列腺癌模型建立的研究

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目的：研究PCA3、AMACR和PSA基因在胎兒前列腺組織發(fā)育中的表達(dá)情況，為進(jìn)一步研究此三種基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制和生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)。方法： 1.本實(shí)驗(yàn)的臨床病例包括胎兒前列腺組18例，胎齡13～25周，平均19周；良性BPH組21例，年齡51～83歲，平均70歲；PCa組15例，年齡53～80歲，平均70歲。 2.采用本實(shí)驗(yàn)室已建立的FQ-RT-PCR方法檢測(cè)前列腺組織標(biāo)本中PCA3mRNA、AMACRmRNA、PSAmRNA和GAPDHmRNA的含量。 3.采用管家基因GAPDH來(lái)校正前列腺組織標(biāo)本細(xì)胞數(shù)，以PCA3mRNA/GAPDHmRNA、AMACRmRNA/GAPDHmRNA和PSAmRNA/GAPDHmRNA進(jìn)行相對(duì)定量。 4.本實(shí)驗(yàn)對(duì)胎兒前列腺組、良性BPH組和PCa組的前列腺組織標(biāo)本的PCA3mRNA/GAPDHmRNA、AMACRmRNA/GAPDHmRNA和PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量分別進(jìn)行了比較和分析。 5.本實(shí)驗(yàn)對(duì)不同胎齡前列腺組，即13～17周組、18～21周組和22～25周組的前列腺組織標(biāo)本的AMACRmRNA/GAPDHmRNA和PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量分別進(jìn)行了比較和分析。結(jié)果： 1.在胎兒前列腺組中18例標(biāo)本均未檢測(cè)到PCA3mRNA的表達(dá)，在良性BPH組21例標(biāo)本和PCa組15例標(biāo)本中均檢測(cè)到PCA3mRNA的表達(dá)，良性BPH組和PCa組中的PCA3mRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量有顯著性差異(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.在各實(shí)驗(yàn)組中均檢測(cè)到AMACRmRNA的表達(dá)，胎兒前列腺組、良性BPH組和Pca組中的AMACRmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量有顯著性差異(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在各實(shí)驗(yàn)組的兩兩比較中，我們也可以發(fā)現(xiàn)，在任何兩組之間AMACRmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量都有較明顯的不同，并且從胎兒前列腺組--良性BPH組--PCa組AMACRmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量依次增高。 3.在各實(shí)驗(yàn)組中均檢測(cè)到PSAmRNA的表達(dá)，胎兒前列腺組、良性BPH組和PCa組中的PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量有顯著性差異(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在各實(shí)驗(yàn)組的兩兩比較中，我們也可以發(fā)現(xiàn)，任何兩組之間PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量都有較明顯的不同，并且從胎兒前列腺組--良性BPH組--PCa組PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量依次增高。 4.13～17周組、18～21周組和22～25周組的AMACRmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量有顯著性差異(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在各實(shí)驗(yàn)組的兩兩比較中，我們可以發(fā)現(xiàn)，13～17周組與其他兩組的AMACRmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量有較明顯的不同，但18～21周組和22～25周組的AMACRmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量未見(jiàn)明顯差異。 5.13～17周組、18～21周組和22～25周組的PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在各實(shí)驗(yàn)組的兩兩比較中，我們也可以發(fā)現(xiàn)，任何兩組之間的PSAmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)含量亦沒(méi)有較明顯的不同。結(jié)論： 1.PCA3基因是在人類前列腺腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中特異增強(qiáng)表達(dá)的，而它在人類胎兒階段的前列腺細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中的可能不起顯著作用。PCA3基因在前列腺細(xì)胞中可能作為調(diào)節(jié)基因發(fā)揮功能，它可能只在前列腺細(xì)胞發(fā)生癌變而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)某些基因表達(dá)失控時(shí)才出現(xiàn)。 2.AMACR基因可能只在胎兒前列腺發(fā)育較早期表達(dá)并發(fā)揮某種促進(jìn)細(xì)胞組織發(fā)展的作用，而到了胎兒前列腺發(fā)育中晚期，它的表達(dá)逐漸減弱乃至被封閉。當(dāng)發(fā)生前列腺腫瘤時(shí)，AMACR基因可能又會(huì)被重新激活并高度表達(dá)，發(fā)揮其在胎兒前列腺階段類似的作用，并且這種作用效果由于其的過(guò)表達(dá)而被高度擴(kuò)大，導(dǎo)致前列腺腫瘤的發(fā)展。 3.PSA基因在前列腺細(xì)胞發(fā)展進(jìn)程的大部分時(shí)期都表達(dá)，說(shuō)明該基因可能對(duì)維持前列腺細(xì)胞基本功能有意義。 PSA基因在前列腺腫瘤階段的失控過(guò)表達(dá)可能目的：建立裸鼠皮下LNCaP前列腺癌模型，為前列腺癌動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究提供工具。方法：以每只10×106LNCaP細(xì)胞數(shù)與基底膜基質(zhì)混合注射入5只BALB/c裸鼠前肢腋窩皮下，于第2至12周分別檢測(cè)裸鼠血漿tPSA含量，12周后處死裸鼠，取皮下腫瘤及相關(guān)器官做病理檢查，監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移情況。結(jié)果： 80％(4/5)裸鼠于第8周后在前肢腋窩皮下長(zhǎng)出腫瘤，腫瘤包膜完整，病理切片可見(jiàn)典型腫瘤細(xì)胞，但5只裸鼠均未發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移；5只裸鼠均可測(cè)得血漿tPSA，且血漿tPSA含量隨腫瘤生長(zhǎng)而升高，其中未長(zhǎng)出實(shí)體瘤的裸鼠血漿tPSA含量亦隨時(shí)間推移而升高。結(jié)論：成功建立了裸鼠皮下LNCaP前列腺癌模型，該模型成功率較高，腫瘤形成時(shí)間較一致，腫瘤在形成、生長(zhǎng)過(guò)程中能持續(xù)穩(wěn)定地分泌PSA，且其分泌量能隨腫瘤生長(zhǎng)而上升，故此模型可以較好地作為一種前列腺癌的研究工具。

著錄項(xiàng)

作者
鄭彥博;
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作者單位

溫州醫(yī)科大學(xué);

溫州醫(yī)學(xué)院;

展開▼
授予單位溫州醫(yī)科大學(xué);溫州醫(yī)學(xué)院;
學(xué)科臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)
授予學(xué)位碩士
導(dǎo)師姓名陶志華,陳曉東;
年度 2008
頁(yè)碼
總頁(yè)數(shù)
原文格式 PDF
正文語(yǔ)種中文
中圖分類前列腺腫瘤;
關(guān)鍵詞
前列腺組織; 基因表達(dá); 前列腺癌; 調(diào)控機(jī)制; 腫瘤發(fā)生; 動(dòng)物模型;

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