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瘤胃表皮葡萄球菌的分離鑒定及其β-葡聚糖酶基因的克隆和在乳酸球菌中表達(dá)的研究

     

摘要

為將瘤胃微生物纖維降解酶基因轉(zhuǎn)化到乳酸菌中,從綿羊瘤胃內(nèi)容物中分離到1株能夠降解羧甲基纖維素鈉的細(xì)菌,經(jīng)過形態(tài)特征及細(xì)菌16S rDNA序列鑒定為表皮葡萄球菌.根據(jù)表皮葡萄球菌在GenBank中公示的β-葡聚糖酶基因序列設(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增引物,克隆到2個(gè)β-葡聚糖酶基因序列.將2個(gè)β-葡聚糖酶基因序列與載體pMG36e連接,構(gòu)建β-葡聚糖酶基因表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌,并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化到乳酸球菌MG1363,均能表達(dá)β-葡聚糖酶,表達(dá)酶活達(dá)1.47 U/mL和1.54 U/mL,比原表皮葡萄球菌酶活0.99 U/mL高出1.49倍和1.56倍.

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