摘要： 背景:介孔生物活性玻璃納米顆粒與甲基丙烯酸明膠合成的仿生骨膜可在骨缺損局部釋放鈣硅磷離子,促進(jìn)成骨。其中硅離子還有調(diào)控巨噬細(xì)胞極化表型的作用,因此仿生骨膜對骨缺損局部炎癥微環(huán)境的影響仍需探索。目的:通過體、內(nèi)外實(shí)驗(yàn)探討無機(jī)離子仿生骨膜調(diào)控炎癥微環(huán)境與促進(jìn)骨修復(fù)之間的聯(lián)系。方法:①體外實(shí)驗(yàn):將介孔生物活性玻璃納米顆粒與甲基丙烯酸明膠共混后光交聯(lián)得到無機(jī)離子仿生骨膜,通過電感耦合等離子體光譜檢測仿生骨膜浸泡于人體模擬體液中7 d內(nèi)的Si^(4+)釋放。將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別接種于甲基丙烯酸明膠水凝膠與仿生骨膜復(fù)合水凝膠中,以單純培養(yǎng)的細(xì)胞為對照,進(jìn)行活死熒光染色與堿性磷酸酶染色。將骨巨噬細(xì)胞分別接種于甲基丙烯酸明膠水凝膠與仿生骨膜復(fù)合水凝膠中,以單純培養(yǎng)的細(xì)胞為對照,進(jìn)行一氧化氮合成酶(巨噬細(xì)胞M1表型)和CD206(巨噬細(xì)胞M2表型)免疫熒光染色。②體內(nèi)實(shí)驗(yàn):建立大鼠顱骨缺損模型,將甲基丙烯酸明膠水凝膠和仿生骨膜復(fù)合水凝膠分別植入骨缺損處,術(shù)后7 d,通過RT-PCR檢測骨缺損局部巨噬細(xì)胞表型;術(shù)后8周,通過骨缺損處蘇木精-伊紅染色檢測仿生骨膜的成骨性能。結(jié)果與結(jié)論:①體外實(shí)驗(yàn):仿生骨膜24 h內(nèi)釋放Si^(4+)達(dá)到最大濃度,在之后6 d內(nèi)緩慢釋放。共培養(yǎng)3 d后的活死熒光染色顯示,各組干細(xì)胞生長良好,有較好的細(xì)胞活性,無明顯死亡。共培養(yǎng)7 d后的免疫熒光染色顯示,仿生骨膜組巨噬細(xì)胞多為M2型,甲基丙烯酸明膠水凝膠組和對照組多為M1型。共培養(yǎng)7 d后的堿性磷酸酶染色顯示,仿生骨膜組染色強(qiáng)于甲基丙烯酸明膠水凝膠組和對照組。②體內(nèi)實(shí)驗(yàn):RT-PCR檢測結(jié)果顯示,仿生骨膜組骨缺損局部巨噬細(xì)胞大多呈M2型,空白組和GelMA水凝膠組大多呈M1型。蘇木精-伊紅染色顯示,仿生骨膜組骨缺損處新生骨多于空白組和甲基丙烯酸明膠水凝膠組。③結(jié)果表明:無機(jī)離子仿生骨膜通過Si^(4+)釋放促進(jìn)了炎癥局部的巨噬細(xì)胞M2極化,可抑制炎癥、促進(jìn)成骨。

摘要： 背景:課題組前期研究發(fā)現(xiàn),糖皮質(zhì)激素可抑制Hedgehog信號通路關(guān)鍵基因的表達(dá),從而擾亂骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨、成脂與成血管方向的分化,進(jìn)而破壞骨內(nèi)血供與骨組織結(jié)構(gòu),而補(bǔ)腎活血膠囊對此具有一定的治療作用。目的:觀察補(bǔ)腎活血膠囊對激素誘導(dǎo)的股骨頭壞死SD大鼠骨組織破壞的修復(fù)作用,進(jìn)一步研究補(bǔ)腎活血膠囊對成骨與Hedgehog信號通路相關(guān)因子的影響機(jī)制。方法:SD大鼠臀肌注射甲潑尼龍琥珀酸鈉建立激素誘導(dǎo)相關(guān)的股骨頭壞死大鼠模型;分別灌胃給予低、中、高不同劑量的補(bǔ)腎活血膠囊干預(yù);并以臀肌注射生理鹽水的大鼠為對照。給藥8周后取材,通過剖檢大體觀察、組織病理學(xué)檢查、qPCR與Western blot分析在不同層面綜合評價(jià)補(bǔ)腎活血膠囊對激素性股骨頭壞死大鼠骨組織修復(fù)的影響及其作用機(jī)制。結(jié)果與結(jié)論:①大體觀察:干預(yù)8周后,各組大鼠股骨頭樣本大體觀無明顯差異;②蘇木精-伊紅染色:與模型組比較,各劑量補(bǔ)腎活血膠囊組大鼠均顯著提高了骨小梁面積、降低了空骨陷窩率;③免疫組化:與模型組比較,各劑量補(bǔ)腎活血膠囊組大鼠在不同程度上提高了堿性磷酸酶、核心結(jié)合因子α1、Ⅰ型膠原蛋白、骨橋蛋白的表達(dá);④qPCR檢測:與模型組比較,各劑量補(bǔ)腎活血膠囊組大鼠提升了成骨相關(guān)指標(biāo)堿性磷酸酶、Ⅰ型膠原蛋白、核心結(jié)合因子α1與Hedgehog信號通路相關(guān)指標(biāo)音猬因子、核轉(zhuǎn)錄因子1、核轉(zhuǎn)錄因子2的mRNA表達(dá);⑤Western blot檢測:與模型組比較,各劑量補(bǔ)腎活血膠囊組大鼠均在不同程度上提高了成骨相關(guān)指標(biāo)堿性磷酸酶、核心結(jié)合因子α1、Ⅰ型膠原蛋白、骨橋蛋白與Hedgehog信號通路相關(guān)指標(biāo)音猬因子、核轉(zhuǎn)錄因子2的蛋白表達(dá);⑥研究初步證實(shí)了補(bǔ)腎活血膠囊對激素性股骨頭壞死有一定的治療作用,其作用機(jī)制與成骨相關(guān)的Hedgehog信號通路具有一定相關(guān)性。

摘要： 背景:據(jù)報(bào)道,激素、酒精均可抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞從而影響骨的形成與修復(fù),而股骨頭塌陷的發(fā)生與機(jī)械應(yīng)力刺激、壞死組織修復(fù)能力相關(guān),推測Piezo1可能是感應(yīng)股骨頭壞死塌陷的力學(xué)敏感蛋白。目的:觀察力學(xué)感應(yīng)蛋白Piezo1在激素性和酒精性股骨頭壞死患者骨組織中的差異表達(dá)。方法:選取30例在2020年8月至2021年4月因股骨頭壞死行人工全髖關(guān)節(jié)置換的患者,收集其股骨頭標(biāo)本及臨床、影像資料。股骨頭標(biāo)本均為ARCOⅢ期;其中男20例,女10例;分為激素組15例,酒精組15例。蘇木精-伊紅染色觀察股骨頭標(biāo)本骨組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化;Westernblot檢測骨組織中Piezo1蛋白的半定量表達(dá);免疫組化檢測Piezo1蛋白在骨組織中的定位表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:①蘇木精-伊紅染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)激素及酒精組壞死區(qū)骨質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂、骨髓壞死,均有大量空虛的骨陷窩;②Western blot結(jié)果提示激素組患者股骨頭骨組織的壞死區(qū)、硬化區(qū)和正常區(qū)Piezo1蛋白的表達(dá)均高于酒精組患者(P<0.05);③免疫組化結(jié)果提示激素性股骨頭壞死組壞死區(qū)、硬化區(qū)和正常區(qū)陽性表達(dá)較酒精組更明顯;④結(jié)果提示,Piezo1可能是感應(yīng)股骨頭壞死塌陷的力學(xué)敏感蛋白,并參與成骨的過程;激素性與酒精性股骨頭壞死骨組織中Piezo1的差異表達(dá)可能與兩者不同的骨形成修復(fù)特點(diǎn)有關(guān)。

摘要： 背景:研究M2巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)骨再生的分子機(jī)制,整理分析多條信號通路的綜合性基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò),對于靶向調(diào)控骨替代材料介導(dǎo)的免疫反應(yīng)從而促進(jìn)牙槽骨缺損修復(fù)具有重要意義。目的:綜述國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn),總結(jié)M2巨噬細(xì)胞在骨再生中的相關(guān)信號通路的研究進(jìn)展,以期為臨床牙槽骨缺損患者的再生治療找到準(zhǔn)確和主動的免疫調(diào)節(jié)策略。方法:檢索CNKI、Web of Science和PubMed數(shù)據(jù)庫收錄的相關(guān)文獻(xiàn)。英文檢索詞為“macrophages,polarization,bone regeneration,osteogenesis,signaling pathway”;中文檢索詞為“巨噬細(xì)胞極化,信號通路,骨再生,成骨”。按入選標(biāo)準(zhǔn)篩選后納入55篇文章進(jìn)行綜述。結(jié)果與結(jié)論:①巨噬細(xì)胞在骨愈合中的作用是復(fù)雜的,通過微調(diào)和精確的策略將M0/M1巨噬細(xì)胞切換到M2表型,導(dǎo)致形成適當(dāng)?shù)腗2優(yōu)勢更加有利于骨再生。一旦M2巨噬細(xì)胞表型發(fā)生改變,它們的細(xì)胞表面標(biāo)志物、分泌的細(xì)胞因子和趨化因子以及轉(zhuǎn)錄和表觀遺傳途徑(信號通路)均產(chǎn)生相應(yīng)變化。②文章總結(jié)分析了近7年來各類信號通路參與M2巨噬細(xì)胞極化從而誘導(dǎo)骨缺損修復(fù)或成骨分化的相關(guān)分子機(jī)制。各信號通路在參與或調(diào)控骨代謝過程中的炎癥反應(yīng)、成骨和軟骨分化等發(fā)揮重要的作用。大量的體內(nèi)外研究表明,靶向調(diào)控信號通路可能是針對巨噬細(xì)胞極化促進(jìn)骨再生的有效途徑。③進(jìn)一步的臨床研究還需要闡明調(diào)節(jié)信號通路以有利于降低M1/M2巨噬細(xì)胞比率可能是促進(jìn)牙槽骨缺損修復(fù)的有效途徑。一旦這種機(jī)制被明確闡明,針對巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)的藥理學(xué)和新型生物材料可能被用作促進(jìn)骨再生的策略。

摘要： 背景:柚皮苷作為一種中藥單體,具有抗炎、促進(jìn)成骨和抗癌等作用;RAW264.7巨噬細(xì)胞在骨破壞過程中發(fā)揮重要作用。有研究發(fā)現(xiàn)降低炎癥水平可以促進(jìn)MC-3T3-E1細(xì)胞的成骨分化,所以通過抑制炎癥相關(guān)通路,可能對成骨細(xì)胞分化具有促進(jìn)作用。目的:觀察柚皮苷通過調(diào)控RAW264.7細(xì)胞功能是否會影響MC-3T3-E1細(xì)胞的成骨分化。方法:采用CCK-8法檢測不同濃度柚皮苷對脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞的毒性。將RAW264.7細(xì)胞分成7組:即對照組(DMEM培養(yǎng)基)、炎癥模型組(1 mg/L脂多糖)和柚皮苷組(1 mg/L脂多糖+50,100,150,200,250μmol/L柚皮苷),通過RT-PCR檢測炎癥因子m RNA水平變化,篩選出抗炎濃度較好的3組(150,200,250μmol/L柚皮苷組)數(shù)據(jù)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。將RAW264.7細(xì)胞分成4組:炎癥模型組、150,200,250μmol/L柚皮苷組分別取各組的上清液制備炎癥上清液。最后將上述制取的炎癥上清液與成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基1∶1比例混合共同培養(yǎng)MC-3T3-E1細(xì)胞并分為5組:對照組、炎癥模型組、150,200,250μmol/L柚皮苷組,培養(yǎng)7,14 d進(jìn)行成骨相關(guān)基因的檢測,并進(jìn)行堿性磷酸酶染色、堿性磷酸酶活性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果與結(jié)論:①1 mg/L的脂多糖對巨噬細(xì)胞無毒性作用,200μmol/L柚皮苷對脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞有細(xì)胞毒性作用(P<0.05);②篩選藥物抗炎濃度過程中,與對照組相比柚皮苷濃度為150,200,250μmol/L時抗炎效果較好(P<0.05),此3組濃度用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);③堿性磷酸酶染色結(jié)果顯示,與對照組相比柚皮苷濃度200μmol/L時染色效果最好,且14 d比7 d染色效果更佳;④與對照組相比,200μmol/L柚皮苷組的成骨基因mRNA表達(dá)水平最接近對照組,成骨效果最差的為炎癥模型(P<0.05);⑤堿性磷酸酶活性實(shí)驗(yàn)中,7 d時與對照組相比,柚皮苷濃度為200μmol/L時堿性磷酸酶活性最強(qiáng)(P<0.05);與炎癥模型組相比,柚皮苷濃度為200μmol/L時最佳(P<0.05);14 d時,與對照組相比,200μmol/L組無顯著差異;與炎癥模型組相比,200μmol/L組活性最強(qiáng);⑥以上結(jié)果證明,柚皮苷通過調(diào)節(jié)RAW264.7巨噬細(xì)胞功能可改善炎癥狀態(tài)下MC-3T3-E1細(xì)胞的成骨分化。

摘要： 背景:隨著口腔納米材料不斷的進(jìn)步與發(fā)展,大量研究發(fā)現(xiàn)碳納米材料在口腔種植領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。目的:文章就碳納米材料主要分類、結(jié)構(gòu)特征、成骨、抗菌、蛋白/藥物載體作用以及在口腔種植方面的相關(guān)應(yīng)用作一綜述。方法:明確碳納米材料的分類后,以“石墨烯/碳納米管/碳納米纖維/碳納米材料,口腔種植/成骨AND口腔/抗菌AND口腔/載藥AND口腔”為中文檢索詞檢索,以“Graphene/carbon nanotubes/Carbon Nanofibers/carbon nanomaterials,dental implant/osteogenesis AND oral/antibacterial AND oral/drug loaded AND oral”為英文檢索詞檢索,由第一作者通過計(jì)算機(jī)在中國知網(wǎng)、萬方、維普及PubMed等數(shù)據(jù)庫檢索1998年1月至2021年8月已發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn),部分經(jīng)典文獻(xiàn)延長檢索時間限制。最終選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的英文文獻(xiàn)64篇、中文文獻(xiàn)9篇。結(jié)果與結(jié)論:①碳納米材料主要分為3類,即零維、一維和二維碳納米材料,因其具有獨(dú)特的空間結(jié)構(gòu)和良好的理化性質(zhì),在種植體表面涂層、支架材料改性、載藥和制備屏障膜等方面具有較大應(yīng)用潛力。②此外材料的成骨和抗菌作用還有利于形成穩(wěn)定的骨整合和良好的軟組織封閉作用,在種植體周圍炎的預(yù)防與治療中也有一定的研究意義。③碳納米材料種類繁多,許多研究還將碳納米材料與其他生物分子材料功能化組合成復(fù)合材料,從而可以獲得某種特性。此外,碳納米材料本身也具備抗菌作用,石墨烯也常與其他抗菌劑(如銀納米粒子)功能化來增強(qiáng)抗菌性能。④綜合來看,碳納米材料中石墨烯作為典型的二維碳納米材料,一直是口腔種植及其他領(lǐng)域研究的熱點(diǎn),其中氧化石墨烯是應(yīng)用較為廣泛的一類石墨烯衍生物材料。有研究發(fā)現(xiàn)將其應(yīng)用于種植體表面改性時,對種植體周圍炎的治療及預(yù)防方面具有一定的研究意義。⑤但關(guān)于碳納米材料誘導(dǎo)干細(xì)胞分化/成骨相關(guān)信號通路以及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究還不太明確,材料的細(xì)胞毒性、降解和不良反應(yīng)也仍需進(jìn)一步研究。⑥目前也有待研究出一種具有成本效益、可擴(kuò)展性和可重復(fù)制備碳納米材料的工藝方法和材料生物相容性的評價(jià)指標(biāo),此外也需進(jìn)一步深入研究當(dāng)碳納米材料應(yīng)用于植體表面涂層時,對種植體周圍炎的預(yù)防與治療意義。

摘要： 背景:骨具有壓電效應(yīng),可將其所受應(yīng)力轉(zhuǎn)化為骨表面的電信號,通過電信號調(diào)節(jié)骨的代謝與生長。具有生物電活性的壓電材料作為骨植入物能在受力時表面生成電荷,恢復(fù)損傷骨組織表面電勢從而達(dá)到促進(jìn)骨愈合的目的。目的:文章從壓電的角度介紹了骨的壓電效應(yīng),說明壓電材料促進(jìn)骨缺損修復(fù)的可行性以及壓電材料應(yīng)用于骨組織工程的研究進(jìn)展,并闡述壓電材料促進(jìn)成骨的機(jī)制,以期為骨缺損修復(fù)提供新的思路。方法:以“Piezoelectric effect,Piezoelectric materials,Piezoelectric ceramic,Piezoelectric polymers,Osteogenesis,Bone tissue engineering,Scaffolds,Bone defect,energy harvester”為英文檢索詞,以“壓電效應(yīng)、壓電材料、壓電陶瓷、壓電聚合物、成骨、骨組織工程、細(xì)胞支架、骨缺損、能量采集器”為中文檢索詞,在PubMed,Web of Science,ScienceDirect,中國知網(wǎng)和萬方數(shù)據(jù)庫中檢索篩選出88篇文獻(xiàn)進(jìn)行歸納總結(jié)。結(jié)果與結(jié)論:①壓電材料具有因受力形變而產(chǎn)電的自發(fā)電特性,能模擬骨組織的細(xì)胞外基質(zhì)的生物電微環(huán)境,可制備成生物支架,在不依賴于生長因子和藥物的情況下給予骨組織電刺激,增強(qiáng)骨修復(fù)功能,在骨缺損的治療中具有應(yīng)用前景。②壓電材料通過刺激細(xì)胞電壓門控鈣通道、α5β1整合素、促進(jìn)局部血流增加等途徑促進(jìn)成骨。③目前尚未發(fā)現(xiàn)任何單一壓電材料可滿足組織工程的壓電材料的特征,因此壓電陶瓷與壓電聚合物相結(jié)合,壓電材料與生物活性材料相結(jié)合的壓電復(fù)合材料應(yīng)運(yùn)而生,其中壓電陶瓷-有機(jī)物復(fù)合材料,保留了壓電陶瓷的壓電性能優(yōu)異和生物相容性良好優(yōu)點(diǎn)的同時更易于加工,其生物相容性和促進(jìn)骨細(xì)胞貼附、礦化等功能更強(qiáng),是當(dāng)前治療骨缺損效果最好的壓電材料;④雖然壓電材料能模擬骨組織的生物電微環(huán)境來促進(jìn)成骨,但由于對壓電材料影響骨細(xì)胞的機(jī)制尚未明確,以及不同骨組織微環(huán)境各不相同,因此限制了壓電材料在臨床的應(yīng)用,隨著材料研發(fā)技術(shù)的進(jìn)步和對壓電材料作用于細(xì)胞的研究愈發(fā)深入,壓電材料有望為骨缺損的修復(fù)提供新的思路。

摘要： 背景:骨肉瘤是臨床常見的疾病,近年來將無機(jī)非金屬生物材料應(yīng)用于骨肉瘤的治療成為克服傳統(tǒng)治療瓶頸的新思路。目的:闡述目前無機(jī)非金屬生物材料在骨肉瘤診治中的應(yīng)用,對其目前的研究現(xiàn)狀及未來的應(yīng)用前景進(jìn)行綜述。方法:應(yīng)用計(jì)算機(jī)檢索Web of Science、PubMed和中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫中涉及無機(jī)非金屬生物材料用于骨肉瘤診治相關(guān)的研究,主要檢索用于骨肉瘤治療的無機(jī)非金屬生物材料的制備、應(yīng)用、動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等的實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn),最終納入69篇文獻(xiàn)進(jìn)行綜述分析。結(jié)果與結(jié)論:①無機(jī)非金屬生物材料具有生物相容性好、理化性質(zhì)穩(wěn)定、可生物降解并兼具促成骨功能等優(yōu)良特征。②無機(jī)非金屬材料固有的抗斷裂性能弱、制備工藝要求高、藥物與生物活性分子負(fù)載劑量小等不足,限制了其在承力區(qū)骨缺損、需持續(xù)可控緩釋藥物等情形的應(yīng)用。③目前無機(jī)非金屬材料在骨肉瘤治療中被廣泛應(yīng)用于納米載藥平臺、生物植入支架以及材料表面涂層等方面,并通過功能化改性在骨肉瘤的化學(xué)動力學(xué)治療、納米靶向診治、催化治療、免疫治療和腫瘤熱療等新型診療策略中顯示出良好效果,但這些研究大多停留在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)階段,尚缺乏臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的支持。④改進(jìn)無機(jī)非金屬材料制備流程、探索新型功能改性策略并進(jìn)一步廣泛開展臨床評價(jià),已成為將現(xiàn)有基礎(chǔ)研究轉(zhuǎn)化為臨床實(shí)踐并促進(jìn)無機(jī)非金屬材料持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵。

摘要： 背景:天然植物提取物香芹酚具有廣譜抗菌性、低耐藥性和低細(xì)胞毒性的特點(diǎn),是近年來抗生素替代物的研究熱點(diǎn),具有很好的前景。目的:測定香芹酚對口腔常見致病菌變異鏈球菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度、最小殺菌濃度,探究香芹酚對這2種菌的抑菌活性及其對成骨細(xì)胞增殖的影響,以期在口腔疾病防治方面提供新的選擇。方法:通過酶標(biāo)儀檢測吸光度值分別測定香芹酚對變異鏈球菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度(MIC)、最小殺菌濃度,采用抑菌圈實(shí)驗(yàn)檢測香芹酚的抑菌活性;CCK-8試劑盒檢測1,4,7 d下不同濃度香芹酚誘導(dǎo)下的MC3T3-E1細(xì)胞增殖情況;堿性磷酸酶、實(shí)時熒光定量PCR試劑盒分別檢測1,7,14 d細(xì)胞堿性磷酸酶活性以及Runx2、骨保護(hù)素基因表達(dá)水平。結(jié)果與結(jié)論:①香芹酚對變異鏈球菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度值分別為0.20%,0.04%,最小殺菌濃度值分別為0.60%,0.12%;②抑菌圈實(shí)驗(yàn)中香芹酚實(shí)驗(yàn)組均顯示出明顯的抑菌圈,差異有顯著性意義(P<0.05);③CCK-8實(shí)驗(yàn)顯示,香芹酚實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖活性明顯增強(qiáng)(P<0.05);④香芹酚各濃度組均使堿性磷酸酶活性增高;7 d時堿性磷酸酶活性增高更明顯,1MIC組效果最突出(P<0.05);⑤實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示,香芹酚實(shí)驗(yàn)組不同基因皆顯示出mRNA高表達(dá)現(xiàn)象,且均出現(xiàn)在1MIC組(P<0.05);提示香芹酚對2種口腔常見致病菌變形鏈球菌和金黃色葡萄菌均具有較強(qiáng)的抑菌活性,并且可以提高M(jìn)C3T3-E1細(xì)胞成骨活性,促進(jìn)其增殖分化。

摘要： 背景:人牙周膜干細(xì)胞具有多向分化的潛能,在一定條件下能夠發(fā)生成骨向分化,誘導(dǎo)骨組織再生,因此,人牙周膜干細(xì)胞作為骨組織工程種子細(xì)胞之一,在牙槽骨缺損骨再生修復(fù)中具有良好的研究前景和臨床應(yīng)用價(jià)值。目的:探討血小板衍生生長因子BB在促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞增殖和成骨分化中的功能特征,旨在為牙槽骨缺損的骨再生修復(fù)提供相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法:人牙周膜干細(xì)胞取自就診于西南醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科正畸拔牙患者的牙周膜組織,CCK-8法繪制第1-6代人牙周膜干細(xì)胞生長曲線,以及不同質(zhì)量濃度血小板衍生生長因子BB作用下人牙周膜干細(xì)胞的增殖曲線。將第3代人牙周膜干細(xì)胞分為空白對照組、成骨誘導(dǎo)液組、成骨誘導(dǎo)液+血小板衍生生長因子BB組,分別誘導(dǎo)7,14,21 d,礦化實(shí)驗(yàn)觀察人牙周膜干細(xì)胞鈣化結(jié)節(jié)形成情況,RT-qPCR、Western blot檢測Runx2、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2的mRNA和蛋白的相對表達(dá)量。結(jié)果與結(jié)論:(1)CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示第2,3代人牙周膜干細(xì)胞的對數(shù)生長期比其余代次細(xì)胞增殖水平顯著升高(P <0.05);(2)同一時間點(diǎn)上,100μg/L血小板衍生生長因子BB組的人牙周膜干細(xì)胞增殖能力明顯優(yōu)于0,50,200μg/L血小板衍生生長因子BB組(P <0.05);(3)100μg/L血小板衍生生長因子BB與成骨誘導(dǎo)液聯(lián)合使用對人牙周膜干細(xì)胞具有明顯的成骨誘導(dǎo)作用,在成骨誘導(dǎo)第14天時,與成骨誘導(dǎo)液組和空白對照組相比,成骨誘導(dǎo)液+血小板衍生生長因子BB組Runx2、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2的mRNA和蛋白相對表達(dá)量明顯升高(P <0.05);(4)結(jié)果表明,血小板衍生生長因子BB能夠促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞的增殖及成骨方向分化。

摘要： 目的:探討成纖維細(xì)胞體外成骨的誘導(dǎo)因素,體外獲取大量成骨型成纖維細(xì)胞,為骨組織修復(fù)提供種子細(xì)胞.方法:分離、純化肉芽組織成纖維細(xì)胞,使其生長在含生肌液60mg/ml、FN40ug/ml的條件培養(yǎng)液中.采用生物化學(xué)、組織化學(xué)和顯微觀察的方法,檢測成纖維細(xì)胞的成骨標(biāo)志.結(jié)果:生肌液和FN促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖、膠原合成、骨鈣素分泌;生肌液可使成纖維細(xì)胞由梭形向圓形或多突形轉(zhuǎn)化,細(xì)胞重疊成多層結(jié)構(gòu),其表面有鈣鹽堆積,逐漸呈云霧狀物質(zhì),不斷融合擴(kuò)大形成不透光的結(jié)節(jié),經(jīng)趨骨性四環(huán)素特異標(biāo)記證明為新生骨組織.結(jié)論:生肌液可誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞成骨.

摘要： 本發(fā)明公開了一種成骨誘導(dǎo)劑及在脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化中的應(yīng)用。RUNX2是成骨分化過程中關(guān)鍵的調(diào)控因子，能夠調(diào)控眾多基因的轉(zhuǎn)錄，RUNX2缺失會導(dǎo)致成骨細(xì)胞的分化完全被抑制。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，川白芷素可顯著提高脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化調(diào)控因子RUNX2的表達(dá)水平，為有效的RUNX2表達(dá)激活劑；將川白芷素作用于脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，茜素紅染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)川白芷素可以顯著提高細(xì)胞鈣礦化結(jié)節(jié)程度，表明川白芷素對ADSCs成骨分化具有顯著的誘導(dǎo)作用。

摘要： 一種基于弓形蟲外分泌蛋白的成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、制備方法及成骨誘導(dǎo)分化方法，其成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基含有弓形蟲外分泌蛋白。成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基還含有地塞米松、L?抗壞血酸、β?甘油磷酸鈉和完全培養(yǎng)基。含量如下：弓形蟲外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L?抗壞血酸：30mM～80mM；β?甘油磷酸鈉：3mM～15mM。本發(fā)明的弓形蟲外分泌蛋白作為成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基添加成分可大幅提高間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化效果。

摘要： 本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物及其成骨誘導(dǎo)方法。本發(fā)明脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物包括鈣粘附蛋白?11和富血小板血漿，該脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物可顯著提高脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)分化能力，采用PRP代替動物血清，減少了其應(yīng)用的風(fēng)險(xiǎn)和免疫原性，并且可應(yīng)用于臨床。

摘要： 本發(fā)明提供納米纖維氈布在制備骨缺損修復(fù)產(chǎn)品或促進(jìn)成骨產(chǎn)品中的用途。本申請中的納米纖維氈布可有效收集生物機(jī)械能并將其轉(zhuǎn)化成電能，并直接用于骨缺損部位細(xì)胞的電刺激，在無需外接供能系統(tǒng)和復(fù)雜電路的同時，實(shí)現(xiàn)宿主的自驅(qū)動電刺激成骨。

摘要： 本發(fā)明屬于生物材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有成骨活性的人工骨修復(fù)材料及其制備方法與應(yīng)用。所述具有成骨活性的人工骨修復(fù)材料的制備方法是將生物活性材料附著于具有三維結(jié)構(gòu)的骨架的表面，冷淬；其中，所述生物活性材料是以熔融態(tài)形式、通過震動方式與骨架復(fù)合。本發(fā)明采用“熔融態(tài)形式”及“震動”相結(jié)合的附著方式，可以使生物活性材料更佳均勻地附著于基礎(chǔ)骨架表面，且結(jié)合緊密程度更高，表面結(jié)構(gòu)也更加規(guī)整，如此可明顯提升人工骨修復(fù)材料的綜合性能。

摘要： 本發(fā)明公開一種調(diào)控細(xì)胞成骨分化的轉(zhuǎn)錄因子及成骨分化細(xì)胞，轉(zhuǎn)錄因子為Zfp260，細(xì)胞為Krt14陽性細(xì)胞或Krt14/Ctsk雙陽性細(xì)胞，成骨分化細(xì)胞的方法包括以下步驟：S1、篩選Krt14陽性細(xì)胞或Krt14/Ctsk雙陽性細(xì)胞作為骨分化細(xì)胞；S2、將步驟S1篩選的骨分化細(xì)胞植入支持載體的內(nèi)部；S3、在所述支持載體的內(nèi)部培養(yǎng)骨分化細(xì)胞，最終形成骨骼；綜上所述，本發(fā)明提供了促進(jìn)骨分化、再生的因子和方法。

摘要： 一種基于弓形蟲外分泌蛋白的成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基、制備方法及成骨誘導(dǎo)分化方法，其成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基含有弓形蟲外分泌蛋白。成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基還含有地塞米松、L?抗壞血酸、β?甘油磷酸鈉和完全培養(yǎng)基。含量如下：弓形蟲外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L?抗壞血酸：30mM～80mM；β?甘油磷酸鈉：3mM～15mM。本發(fā)明的弓形蟲外分泌蛋白作為成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基添加成分可大幅提高間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化效果。

摘要： 本發(fā)明公開了一種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物，由以下原料組成：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、β?甘油磷酸二鈉、磷酸鐵鋰、納米硒化鉍、泡桐素、成纖維細(xì)胞生長因子、重組胰島素。本發(fā)明提供的組合物添加磷酸鐵鋰、納米硒化鉍以及泡桐素等成分，能有效提高細(xì)胞的成骨增殖分化效率。其中添加的磷酸鐵鋰、納米硒化鉍提高了脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化信號活性，能有效促進(jìn)細(xì)胞的成骨分化。泡桐素和成纖維細(xì)胞生長因子、重組胰島素一起促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，縮短細(xì)胞分化時間。本發(fā)明還提供一種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)方法，采用本發(fā)明提供的組合物可以高效穩(wěn)定的對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成骨誘導(dǎo)分化，保障了脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在骨組織工程中的應(yīng)用。

摘要： 本發(fā)明公開了一種成骨誘導(dǎo)劑及在脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化中的應(yīng)用。RUNX2是成骨分化過程中關(guān)鍵的調(diào)控因子，能夠調(diào)控眾多基因的轉(zhuǎn)錄，RUNX2缺失會導(dǎo)致成骨細(xì)胞的分化完全被抑制。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，川白芷素可顯著提高脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化調(diào)控因子RUNX2的表達(dá)水平，為有效的RUNX2表達(dá)激活劑；將川白芷素作用于脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，茜素紅染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)川白芷素可以顯著提高細(xì)胞鈣礦化結(jié)節(jié)程度，表明川白芷素對ADSCs成骨分化具有顯著的誘導(dǎo)作用。

摘要： 本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物及其成骨誘導(dǎo)方法。本發(fā)明脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物包括鈣粘附蛋白-11和富血小板血漿，該脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組合物可顯著提高脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)分化能力，采用PRP代替動物血清，減少了其應(yīng)用的風(fēng)險(xiǎn)和免疫原性，并且可應(yīng)用于臨床。