摘要： 2020年,對于黃鎮(zhèn)和他的沃森生物技術(shù)有限公司來說,會是一個值得紀(jì)念的年份。隨著13價肺炎結(jié)合疫苗上市,黃鎮(zhèn)向著“讓中國兒童用上西方發(fā)達(dá)國家同品質(zhì)的國產(chǎn)疫苗”的誓言,又邁進(jìn)了一步。疫苗的研發(fā)與生產(chǎn),從來都彰顯著一個國家生命安全的重量。作為一名生物科技工作者,黃鎮(zhèn)在云南創(chuàng)建了全省第一個、也是至今唯一的細(xì)菌性結(jié)合疫苗創(chuàng)新技術(shù)平臺。

摘要： 首款治療腦瘤的溶瘤病毒療法在日本獲批。近期,美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)通過加速批準(zhǔn)途徑批準(zhǔn)了Aduhelm(aducanumab)用于治療阿爾茨海默病(AD)患者。龍沙與Moderna宣布擴(kuò)大合作,在荷蘭生產(chǎn)Moderna新冠疫苗原液。輝瑞肺炎球菌20價結(jié)合疫苗獲美國FDA批準(zhǔn)。西門子助力實現(xiàn)過程工業(yè)的數(shù)字化轉(zhuǎn)型。

摘要： 目的 研制新型非天然氨基酸標(biāo)記的HiD-Hin47融合載體蛋白.方法 選擇融合蛋白氨基酸序列中合適位置的20個氨基酸位點,利用非天然氨基酸標(biāo)記技術(shù)將原有氨基酸位置插入一種含疊氮基的非天然氨基酸N6-(2-疊氮乙氧羰基)-L-賴氨酸(NAEK),對不同位點插入NAEK的融合蛋白進(jìn)行表達(dá)和純化,純化后產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE分析,觀察各位點融合蛋白產(chǎn)量,最終E677位點表達(dá)穩(wěn)定性更高,均能達(dá)到野生型的70％,選擇E677位點表達(dá)的融合蛋白與3型和6B型肺炎球菌多糖發(fā)生click反應(yīng)完成偶聯(lián),所得結(jié)合物純化后進(jìn)行動物實驗和免疫學(xué)檢測,并與CRM197、破傷風(fēng)類毒素(TT)、HiD以常規(guī)結(jié)合方式與3型和6B型肺炎球菌多糖結(jié)合產(chǎn)物進(jìn)行對比.結(jié)果 以HiD-Hin47為載體蛋白的3型肺炎球菌多糖結(jié)合物的免疫原性稍優(yōu)于與其余3組結(jié)合物,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義;以HiD-Hin47為載體蛋白的6B型肺炎球菌多糖結(jié)合物的免疫原性顯著優(yōu)于以TT、HiD為載體的結(jié)合物,與以CRM197為載體結(jié)合物的免疫原性差異無統(tǒng)計學(xué)意義.結(jié)論 NAEK標(biāo)記的HiD-Hin47具有作為肺炎球菌多糖蛋白結(jié)合疫苗載體蛋白的潛力,值得進(jìn)行進(jìn)一步研究.

摘要： 目的:評價以白喉毒素?zé)o毒突變體CRM197蛋白為載體的b型流感嗜血桿菌(haemophilus influenzae type b,Hib)結(jié)合疫苗原液及成品在不同儲存條件下主要質(zhì)量指標(biāo)的變化,為該疫苗保存條件及有效期制定提供依據(jù).方法:將b型流感嗜血桿菌結(jié)合物原液分別于2～8°C放置3,6,12個月,20～ 25°C放置4,8周,37°C放置2,4,6周后,進(jìn)行多糖含量、游離多糖含量、蛋白含量、糖/蛋白比值、游離蛋白百分比、pH值、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查、分子量等主要質(zhì)量指標(biāo)檢測,結(jié)合疫苗成品分別于2～8°C放置6,12,18,24,30,36個月,20～ 25°C放置6,12個月,37°C放置1,3,6,9個月后,進(jìn)行多糖含量、游離多糖含量、蛋白含量、糖/蛋白比值、游離蛋白百分比、pH值、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查、分子量主要質(zhì)量指標(biāo)的檢測.結(jié)果:b型流感嗜血桿菌結(jié)合物原液2～8°C放置12個月,20 ～ 25°C放置8周,37 °C放置6周后,各項質(zhì)量指標(biāo)均符合規(guī)定;疫苗成品2～8°C放置36個月,20 ～ 25°C放置12個月,37°C放置6個月后,各項質(zhì)量指標(biāo)均符合規(guī)定.結(jié)論:以白喉類毒素?zé)o毒突變體CRM197蛋白為載體的b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗原液及成品具有良好的穩(wěn)定性.

摘要： Objective:To establish a conjugated method for group W135 meningococcal polysaccharide conjugate with CRM197.Methods:Polysaccharides were oxidized by sodium periodate oxidation and subsequent analysized by ion chromatography(IC),to define oxidation degree by the measurement of aldehyde and polysaccharides.NIH mice were immunized with the conjugate vaccine carrying polysaccharides with different oxidation degree,and antibody titers against MW135 polysaccharide were analyzed with indirect ELISA.Results:Administration unoxidize sample did not induce any antibodies in mice.However,the MW135-CRM197 glyconjugate induced high titer antibodies in which the polysaccharide was oxidized by the best concentration of sodium periodate of 0.4 and 1 g·L-1.Conclusion:The results showed that conjugate vaccine prepared under the conditions retained intact antigenicity.It was applicable to prepare MW135 conjugate vaccine by the process conditions.%目的:建立一種W135群腦膜炎球菌莢膜多糖(MW135)與CRM197蛋白結(jié)合的方法.方法:使用高碘酸鈉對MW135進(jìn)行氧化,離子色譜(IC)方法檢測其氧化位點,通過對醛基和多糖含量的測定來計算其氧化度,將不同氧化度的多糖與CRM197進(jìn)行結(jié)合,免疫NIH小鼠并用間接ELISA法測定小鼠血清中針對MW135多糖的抗體滴度.結(jié)果:MW135多糖無法在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生抗體,高碘酸鈉(0.4和1g·L-1)氧化后的結(jié)合產(chǎn)物能誘導(dǎo)出高水平血清抗MW135抗體.結(jié)論:本實驗條件下制備的結(jié)合疫苗保留了完整的抗原性,以該工藝制備MW135多糖蛋白結(jié)合疫苗是可行的.

摘要： 目的 利用肺炎球菌表面黏附素A(PsaA)為蛋白載體研制b型流感嗜血桿菌(Hib)多糖與蛋白的結(jié)合疫苗,并研究其在幼齡大鼠體內(nèi)的免疫原性以及對肺炎球菌導(dǎo)致的急性中耳炎(AOM)的免疫保護(hù)作用.方法 運用酰胺縮合法將PsaA與Hib莢膜多糖偶聯(lián)結(jié)合制備多糖蛋白結(jié)合疫苗.選取30只約3周齡無特定病原體(SPF)雌性SD大鼠,體重88 ～ 102 g,隨機(jī)分成實驗組和對照組,每組15只.對幼齡SD大鼠進(jìn)行疫苗接種,實驗組接種Hib-PsaA疫苗,對照組接種磷酸鹽緩沖液(PBS).每2周接種1次,3次接種后檢測動物血清相關(guān)抗體免疫球蛋白G(IgG)水平.然后對實驗組及對照組大鼠分別以肺炎球菌經(jīng)鼓膜穿刺注入中耳以誘發(fā)AOM,觀察2組大鼠發(fā)生AOM的炎癥反應(yīng)情況.結(jié)果 運用酰胺縮合法將PsaA與Hib多糖偶聯(lián)結(jié)合,結(jié)合物的洗脫峰明顯前移,表明細(xì)菌多糖與載體蛋白結(jié)合成功.接種該結(jié)合疫苗的實驗組幼齡大鼠產(chǎn)生的抗PsaA抗體IgG的幾何平均滴度(GMT)為11 138,抗Hib抗體IgG的GMT為7 017,而對照組抗PsaA抗體IgG的GMT與抗Hib抗體IgG的GMT分別為729和348.實驗組2種抗體IgG均明顯高于對照組(P＜0.001).肺炎球菌攻擊后組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn),實驗組大鼠在細(xì)菌攻擊后第3天和第7天中耳炎癥反應(yīng)明顯輕于對照組,顯示Hib-PsaA結(jié)合疫苗對肺炎球菌誘發(fā)的大鼠AOM有免疫保護(hù)作用.結(jié)論 運用酰胺縮合法可成功將PsaA蛋白與Hib多糖偶聯(lián)結(jié)合,所制備的多糖蛋白結(jié)合疫苗在幼齡大鼠體內(nèi)可誘導(dǎo)分別針對PsaA和Hib多糖的有效免疫應(yīng)答反應(yīng),并且可有效預(yù)防肺炎球菌導(dǎo)致的大鼠AOM.

摘要： 目的:研制5型肺炎鏈球菌莢膜多糖(PN5PS)與白喉無毒突變體(CRM197)結(jié)合疫苗.方法:采用還原胺化法制備結(jié)合物,即以肺炎5型多糖的鄰位羥基作為活化位點,用高碘酸鈉進(jìn)行氧化,形成的醛基與CRM197蛋白上的氨基生成席夫堿反應(yīng),在氰基硼氫化鈉的作用下形成共價結(jié)合物,并將制備的結(jié)合物與兩種不同鋁佐劑吸附,用間接ELISA法檢測大鼠血清中針對肺炎5型多糖的抗體效價,比較結(jié)合疫苗與不同佐劑吸附前后的免疫原性.結(jié)果:當(dāng)多糖活化度為7.3時,總糖及蛋白的回收率較高,游離糖含量較低,糖蛋白結(jié)合比在1.2～2.7時結(jié)合疫苗具有較強(qiáng)的免疫原性,結(jié)合比為1.9時結(jié)合疫苗的免疫原性最強(qiáng);結(jié)合物吸附磷酸鋁佐劑后所產(chǎn)生的抗體水平略高于氫氧化鋁.結(jié)論:通過還原胺化法制備的PN5PS-CRM197結(jié)合疫苗具有較好的免疫原性.

摘要： 孩子預(yù)防接種的疫苗可以溯源嗎?家長通過什么途徑可以獲知相關(guān)信息?A目前,預(yù)防接種的疫苗可以通過查詢疫苗的批號實現(xiàn)溯源。每種疫苗均有生產(chǎn)企業(yè)名稱、生產(chǎn)日期、批號等信息,疫苗從生產(chǎn)企業(yè)直至配送到預(yù)防接種單位,各過程都會記錄詳細(xì)的相關(guān)信息,因此,根據(jù)疫苗種類、生產(chǎn)日期、批號,結(jié)合疫苗的采購與儲運信息,可以追蹤到疫苗的存放地點、是否已使用、庫存數(shù)量等信息,家長可以通過預(yù)防接種證登記的疫苗批號,獲知所接種的同一批號疫苗的相關(guān)信息。

摘要： 目的 評價傷寒Vi多糖蛋白結(jié)合疫苗原液的穩(wěn)定性,為該疫苗原液的制備、儲存提供有力的數(shù)據(jù)支持.方法 選取3批傷寒Vi多糖蛋白結(jié)合疫苗原液分別放置于(37±2)°C、(25±2)°C和2～8°C溫度下,根據(jù)穩(wěn)定性研究方案定期取樣,對其主要評價指標(biāo)(多糖含量、結(jié)合物含量、相對分子質(zhì)量、鑒別試驗)進(jìn)行檢測,評估疫苗原液的穩(wěn)定性.結(jié)果 傷寒Vi多糖蛋白結(jié)合疫苗原液于2～8°C放置22個月,(25±2)°C放置52 w,(37±2)°C放置24 w時,各項主要評價指標(biāo)均符合其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求.結(jié)論 傷寒Vi多糖蛋白結(jié)合疫苗原液穩(wěn)定性良好,在2～8°C可穩(wěn)定存放22個月.

摘要： 目的 在b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗生產(chǎn)過程中有效監(jiān)控1-氰基-4-二甲基氨基-吡啶四氟化硼(CDAP)的殘留量.方法 在已有針對流腦多糖衍生物的基于強(qiáng)陽離子交換層析檢測法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn).結(jié)果 該法具有良好的專屬性、準(zhǔn)確度、精密度,最低檢出限為6μg/L,且在20 ～ 100μg/L的范圍內(nèi)線性良好.結(jié)論 建立了一種針對b型流感嗜血桿菌多糖衍生物中CDAP的檢測方法.

摘要： 病原菌的O多糖(OPS)、莢膜多糖(CPS)往往是其重要的保護(hù)性抗原,以細(xì)菌多糖為保護(hù)性抗原的疫苗一直是細(xì)菌疫苗研發(fā)的重點之一.目前,已有一批多糖疫苗上市多年,但多糖疫苗的免疫記憶性和免疫原性較弱,特別是在2歲以下兒童和老年人體內(nèi)尤為突出.如今,這類疫苗的研發(fā)重點已轉(zhuǎn)向多糖-蛋白結(jié)合疫苗,其中7價肺炎結(jié)合疫苗、4價腦膜炎結(jié)合疫苗、b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗已經(jīng)上市,且一批多糖-蛋白結(jié)合疫苗正處于不同的研發(fā)階段.目前，G1ycoUaxyn AG公司開發(fā)出了基于空腸彎曲弧菌N一糖基化修飾系統(tǒng)的生物交聯(lián)技術(shù)，制備了基于痢疾桿菌O多糖和金黃色葡萄球菌莢膜多糖的結(jié)合疫苗，并分別進(jìn)入臨床前研究和一期臨床研究。

摘要： 目的：比較兩種b型流感嗜血桿菌(Hib)結(jié)合疫苗的免疫原性。方法：本研究選取一批國產(chǎn)和一批進(jìn)口Hib結(jié)合疫苗，按照開放、隨機(jī)、雙盲的原則。選擇1970名2月齡～5歲的健康嬰幼兒為觀察對象，按年齡分層為2～5月齡750人，6～11月齡620人，1～5歲600人。兩種疫苗按1：1比例進(jìn)行隨機(jī)分配，2～5月齡嬰兒于0、1、2月，6～11月齡嬰幼兒于0、1月，1～5歲幼兒于0月免疫程序分別接種1劑疫苗。各組于首劑免疫前和末次免疫后1個月采集靜脈血，分離血清，采用ELISA法檢測血清多聚核糖基核糖醇(PRP)抗體。結(jié)果：免疫國產(chǎn)Hib結(jié)合疫苗后各年齡段嬰幼兒血清PRP抗體濃度均達(dá)到1.0μg／ml以上，保護(hù)率為100％;而免疫進(jìn)口疫苗后，各年齡段均有血清PRP抗體濃度<0.15μg／ml的嬰幼兒，總保護(hù)率為99.3％。但是，免疫后國產(chǎn)疫苗組血清PRP抗體幾何平均濃度(GMC)普遍低于進(jìn)口疫苗，小于6月齡組分別為14.136和18.135,6月齡至小于1歲組分別為21.457和25.728，1～5歲組分別為31.095和38.119。結(jié)論：不同Hib結(jié)合疫苗免疫后的血清抗體水平分布雖然相似，但抗體GMC存在一定差異，應(yīng)關(guān)注其抗體親和力，跟蹤其免疫持久性。

摘要： 目的:研制b型流感嗜血桿菌(Hib)結(jié)合疫苗并考察其穩(wěn)定性。rn 方法:用溴化氰活化提純Hib莢膜多糖抗原，通過己二酰肼(ADH)與破傷風(fēng)類毒素(TT)蛋白共價結(jié)合，制備b型流感嗜血桿菌結(jié)合物，并考察放置在2～8°C及室溫9個月和37°C3個月后的穩(wěn)定性。rn 結(jié)果:用本工藝提取的多糖，合成的多糖衍生物，多糖蛋白結(jié)合物的化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)特性均達(dá)到了國外同類產(chǎn)品的質(zhì)控要求。結(jié)合物在2～8°C及室溫放置9個月后基本無降解。rn 結(jié)論:為臨床評價Hib結(jié)合疫苗的安全性和保護(hù)效果及確定效期提供了實驗基礎(chǔ)。

摘要： 目的：利用基因工程技術(shù)在大腸桿菌中對CRM197進(jìn)行克隆表達(dá)，探索是否可以得到能夠產(chǎn)生重組CRM197的大腸桿菌重組菌株，對重組蛋白進(jìn)行純化，并考察重組CRM197作為蛋白載體是否具有可行性，增加我國結(jié)合疫苗的載體類型。rn 方法: 提取白喉棒狀桿菌C7/β197株基因組DNA為模板，運用PCR技術(shù)擴(kuò)增crml97基因。構(gòu)建PCR 2.1-TOPO/crm197重組克隆質(zhì)粒，雙酶切鑒定后，篩選陽性克隆進(jìn)行基因測序分析，然后將序列正確的crm197基因克隆人表達(dá)載體pET28a中，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，用IPTC誘導(dǎo)表達(dá)，采用金屬鎳離子親和層析純化重組目的蛋白，免疫印跡法對重組CRM197進(jìn)行鑒定。重組CRM197的初步應(yīng)用：用溴化氰活化A群腦膜炎球菌莢膜多糖(GAMP)，以ADH作為連接劑，以重組CRM197為蛋白載體，在EDAC的作用下制備GAMP-rCRM197結(jié)合物；結(jié)合物經(jīng)凝膠過濾層析純化，產(chǎn)物進(jìn)行理化性質(zhì)檢測。然后將 GAMP、GAMP+rCRM197混合物和GAMP-rCRM197結(jié)合物分別經(jīng)皮下免疫接種Balb/c小鼠(18～20g)，免疫劑量為2.5μg多糖/只。間接ELISA法測定血清中A群腦膜炎球菌多糖特異的IgG抗體，對結(jié)合物的免疫原性進(jìn)行初步分析。rn 結(jié)果: 重組CRM197在大腸桿菌BL21(DE3)中主要以包涵體形式表達(dá)，表達(dá)量占全菌體蛋白的25％左右，經(jīng)純化后重組CRM197純度達(dá)到95％以上，免疫印跡法證明重組CRM197具有良好的抗原性；將重組CRM197與A群腦膜炎球菌多糖偶聯(lián)制備了GAMP-rCRM197結(jié)合物，對結(jié)合物的免疫原性進(jìn)行了初步分析，結(jié)果證明結(jié)合物中的多糖具有良好的免疫原性，重復(fù)接種產(chǎn)生了免疫增強(qiáng)效應(yīng)，初步說明重組CRM197起到了載體蛋白的作用。rn 結(jié)論: 本課題初步達(dá)到了研究目的，說明以重組CRM197作為蛋白載體具有可行性，為以重組CRM197為蛋白載體制備其他結(jié)合疫苗，奠定了實驗基礎(chǔ)。

摘要： 疫苗是預(yù)防和控制腦膜炎球菌感染的有效途徑,本文對A群腦膜炎球菌結(jié)合疫苗的臨床安全性和免疫原性研究進(jìn)行回顧綜述。

摘要： 目的:通過三種不同載體(TT、DT、rEPA)與C群腦膜炎球菌莢膜多糖(GCMP)結(jié)合,經(jīng)免疫小鼠后比較三種結(jié)合疫苗的免疫原性. 方法:將C群腦膜炎球菌莢膜多糖以ADH作為間隔劑分別與TT、DT和rEPA等3種蛋白質(zhì)載體結(jié)合形成GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗,以C群腦膜炎球菌莢膜多糖和3種結(jié)合疫苗免疫NIH小鼠以研究在其體內(nèi)的免疫原性. 結(jié)果:C群腦膜炎球菌莢膜多糖和結(jié)合疫苗免疫NIH小鼠后,其血清ELISA結(jié)果顯示多糖疫苗和結(jié)合疫苗均可誘生免疫應(yīng)答,但使用GCMP免疫小鼠后僅能產(chǎn)生較低水平抗GCMP的IgG抗體,而用3種GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗免疫后小鼠血清中產(chǎn)生了較GCMP免疫顯著增高的抗GCMP的IgG抗體,并且3種GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗組第二次和第三次免疫后與初次免疫相比,IgG抗體水平均有顯著升高(P＜0.001),表明GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗具有免疫記憶和再次免疫加強(qiáng)應(yīng)答效應(yīng),且三種GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的抗GCMP水平有顯著性差異(P＜0.01).補(bǔ)體介導(dǎo)的血清抗體體外殺菌試驗結(jié)果證明,3種GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗組免疫小鼠誘導(dǎo)的IgG抗體均比GCMP組具有增強(qiáng)的體外殺菌活性. 結(jié)論:經(jīng)三種不同載體與C群腦膜炎球菌莢膜多糖結(jié)合后免疫小鼠均產(chǎn)生了比GCMP顯著增高的免疫應(yīng)答.比較研究表明,rEPA是實驗中GCMP-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗較好的選用載體.

摘要： 本文概述了細(xì)菌多糖及其免疫學(xué)的基本特性、細(xì)菌性結(jié)合疫苗的類型；介紹了國外結(jié)合疫苗研究現(xiàn)狀與蘭州所結(jié)合疫苗研究進(jìn)展。

摘要： 分別提取金葡菌的莢膜多糖和鏈球菌的G蛋白，通過碳二亞胺將二者偶合制成一種偶聯(lián)苗，希望獲得一種對金葡菌和鏈球菌皆有預(yù)防效果的疫苗。用此偶合苗免疫小鼠，采血分離血清，通過ELISA檢測小鼠血清中抗莢膜多糖抗體水平及抗鏈球菌G蛋白抗體水平，并用豚鼠血清補(bǔ)體介導(dǎo)進(jìn)行體外殺菌實驗，結(jié)果顯示該偶合疫苗免疫小鼠后小鼠血清中能同時檢測到抗金葡菌莢膜多糖和鏈球菌G蛋白抗體，比單獨用多糖和蛋白免疫小鼠產(chǎn)生了較強(qiáng)的抗體效價水平，而且產(chǎn)生的抗體有較強(qiáng)的體外殺菌活性。

摘要： 目的：肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)表面蛋白C3-BP免疫學(xué)效果初步研究。rn 方法：通過離子交換層析、凝膠過濾層析和親和層析等方法從9V型肺炎鏈球菌培養(yǎng)液上清中提取C3-BP，用SDS-PAGE檢測其純度，用Western blotting檢測其補(bǔ)體C3結(jié)合活性，用ELISA法測定小鼠血清IgG抗體，用MTT法測定小鼠脾淋巴細(xì)胞增值情況，活菌攻擊檢測其交叉保護(hù)效果。rn 結(jié)果: 獲得了較純的表面蛋白C3-BP，其分子量約為90kD，單鏈蛋白；免疫小鼠后，抗體滴度顯著升高；小鼠細(xì)胞免疫實驗表明有較好的細(xì)胞免疫活性。rn 結(jié)論: 摸索出了一種提取肺炎鏈球菌表面蛋白C3-BP的方法；C3-BP具有不依賴血清型的交叉保護(hù)作用。

摘要： 目的：肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)表面蛋白C3-BP免疫學(xué)效果初步研究。rn 方法：通過離子交換層析、凝膠過濾層析和親和層析等方法從9V型肺炎鏈球菌培養(yǎng)液上清中提取C3-BP，用SDS-PAGE檢測其純度，用Western blotting檢測其補(bǔ)體C3結(jié)合活性，用ELISA法測定小鼠血清IgG抗體，用MTT法測定小鼠脾淋巴細(xì)胞增值情況，活菌攻擊檢測其交叉保護(hù)效果。rn 結(jié)果: 獲得了較純的表面蛋白C3-BP，其分子量約為90kD，單鏈蛋白；免疫小鼠后，抗體滴度顯著升高；小鼠細(xì)胞免疫實驗表明有較好的細(xì)胞免疫活性。rn 結(jié)論: 摸索出了一種提取肺炎鏈球菌表面蛋白C3-BP的方法；C3-BP具有不依賴血清型的交叉保護(hù)作用。

摘要： 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)與疫苗技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種表面覆蓋Fc親和蛋白的鋁納米晶遞送系統(tǒng)及自組裝顆粒佐劑疫苗的制備方法。其中鋁納米晶作為載體，在鋁納米晶表面覆蓋有Fc親和蛋白分子層與抗原分子，由重組Fc Tag的抗原通過與Fc親和蛋白特異性結(jié)合，實現(xiàn)抗原自組裝，形成類病毒顆粒疫苗，提升抗原密度。該疫苗對接種部位刺激小，安全性高，能夠通過誘導(dǎo)體液及細(xì)胞免疫，產(chǎn)生高滴度的特異性抗體，是一種高效、便捷的自組裝顆粒疫苗制備方法。

摘要： 本發(fā)明提供了例如用于瘧疾疫苗的根據(jù)SEQ ID NO:1的瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白的片段。本發(fā)明還提供了編碼根據(jù)SEQ ID NO:1的瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白的片段的核酸、包含根據(jù)SEQ ID NO:1的瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白的片段的組合物和結(jié)合根據(jù)SEQ ID NO:1的瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白的片段的抗體。根據(jù)本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合惡性瘧原蟲子孢子并且可用于治療和/或預(yù)防瘧疾。

摘要： 本公開內(nèi)容涉及用于在對象中誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的方法和組合物，其包括向所述對象提供肽或蛋白質(zhì)疫苗以及與PD?L1和CD137(例如人PD?L1和人CD137)結(jié)合的結(jié)合劑(例如雙特異性抗體)，其例如通過以下手段來進(jìn)行：向所述對象共同施用用于疫苗接種的肽或蛋白質(zhì)或者編碼用于疫苗接種的肽或蛋白質(zhì)的多核苷酸特別是RNA，以及與PD?L1和CD137結(jié)合的結(jié)合劑或者編碼與PD?L1和CD137結(jié)合的結(jié)合劑的多核苷酸(特別是RNA)。本公開內(nèi)容還涉及可用于本文中公開的方法中的藥物制劑。

摘要： 本發(fā)明涉及一種由乙型腦炎病毒疫苗和腦膜炎球菌結(jié)合疫苗制備的聯(lián)合疫苗及其制備方法。將乙型腦炎病毒經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)、收獲、滅活、超濾濃縮、純化獲得的乙型腦炎病毒原液，再與純化的A群腦膜炎球菌多糖和C群腦膜炎球菌多糖分別與B群腦膜炎球菌外膜蛋白進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)而形成的結(jié)合物原液，配制成一種乙型腦炎和腦膜炎聯(lián)合疫苗。這種聯(lián)合疫苗可以分別預(yù)防嬰幼兒、兒童、青少年及成人因乙型腦炎病毒和A、B、C群腦膜炎球菌感染引起的腦炎和腦膜炎及敗血癥疾病。

摘要： 本發(fā)明公開了一種多糖蛋白結(jié)合疫苗中多糖蛋白結(jié)合位點結(jié)合率的測定方法：(1)標(biāo)準(zhǔn)品的酶解；(2)固相萃取富集目標(biāo)肽段；(3)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析；(4)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得標(biāo)準(zhǔn)工作曲線方程；(5)樣品檢測，計算得到樣品中各特征肽段的濃度；(6)計算各特征肽段的多糖結(jié)合率、各位點蛋白殘留率。本發(fā)明實現(xiàn)了多糖蛋白結(jié)合疫苗多糖蛋白結(jié)合率的多位點定量監(jiān)測，其中破傷風(fēng)蛋白涉及20個監(jiān)測位點，CRM197涉及16個監(jiān)測位點。本發(fā)明不僅可以檢測殘留蛋白含量，還可以評價多糖蛋白結(jié)合疫苗多糖蛋白結(jié)合位點的結(jié)合率，也可用于多糖或蛋白殘余率相同但活性和毒性不同的多糖蛋白結(jié)合疫苗的研究，可為改進(jìn)多糖蛋白結(jié)合工藝提供直接的監(jiān)測方法。

摘要： 本發(fā)明公開了一種測定Hib結(jié)合疫苗中高分子結(jié)合物含量的方法，它通過脫氧膽酸鈉在酸性條件下形成膠團(tuán)并吸附沉淀蛋白質(zhì)的特性，使結(jié)合態(tài)多糖與游離態(tài)多糖分離，再通過50%乙醇水溶液溶解出低分子結(jié)合物，以實現(xiàn)對高分子結(jié)合物的分離測定。

摘要： 本發(fā)明涉及一種由乙型腦炎病毒疫苗和腦膜炎球菌結(jié)合疫苗制備的聯(lián)合疫苗及其制備方法。將乙型腦炎病毒經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)、收獲、滅活、超濾濃縮、純化獲得的乙型腦炎病毒原液，再與純化的A群腦膜炎球菌多糖和C群腦膜炎球菌多糖分別與B群腦膜炎球菌外膜蛋白進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)而形成的結(jié)合物原液，配制成一種乙型腦炎和腦膜炎聯(lián)合疫苗。這種聯(lián)合疫苗可以分別預(yù)防嬰幼兒、兒童、青少年及成人因乙型腦炎病毒和A、B、C群腦膜炎球菌感染引起的腦炎和腦膜炎及敗血癥疾病。

摘要： 本發(fā)明公開了一種多糖蛋白結(jié)合疫苗中多糖蛋白結(jié)合位點結(jié)合率的測定方法：(1)標(biāo)準(zhǔn)品的酶解；(2)固相萃取富集目標(biāo)肽段；(3)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析；(4)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得標(biāo)準(zhǔn)工作曲線方程；(5)樣品檢測，計算得到樣品中各特征肽段的濃度；(6)計算各特征肽段的多糖結(jié)合率、各位點蛋白殘留率。本發(fā)明實現(xiàn)了多糖蛋白結(jié)合疫苗多糖蛋白結(jié)合率的多位點定量監(jiān)測，其中破傷風(fēng)蛋白涉及20個監(jiān)測位點，CRM197涉及16個監(jiān)測位點。本發(fā)明不僅可以檢測殘留蛋白含量，還可以評價多糖蛋白結(jié)合疫苗多糖蛋白結(jié)合位點的結(jié)合率，也可用于多糖或蛋白殘余率相同但活性和毒性不同的多糖蛋白結(jié)合疫苗的研究，可為改進(jìn)多糖蛋白結(jié)合工藝提供直接的監(jiān)測方法。

摘要： 本文提供了工程改造的無催化性無毒性破傷風(fēng)毒素變體，以低劑量使用所述破傷風(fēng)毒素變體的方法，和保護(hù)性疫苗，其無毒性且比其對應(yīng)的化學(xué)滅活的類毒素而言效力更高。另外，本文提供了結(jié)合疫苗運載體，其包含工程改造的破傷風(fēng)毒素變體，以及用這些結(jié)合疫苗引發(fā)T細(xì)胞依賴性免疫記憶應(yīng)答的方法，其能作為單一疫苗靶向廣譜的微生物病原體。

摘要： 本發(fā)明公開了一種肺炎球菌多糖結(jié)合疫苗各型結(jié)合原液吸附率測定方法，包括以下步驟：對供試品進(jìn)行處理，得到目標(biāo)樣A；對酶標(biāo)板進(jìn)行包被以及封閉處理；將稀釋后的供試品以及目標(biāo)樣A分別加入到被包被以及封閉處理的酶標(biāo)板中，得到供試品測試樣和目標(biāo)樣A測試樣；供試品測試樣和目標(biāo)樣A測試樣中均加入特異性抗血清，得到供試品反應(yīng)樣和目標(biāo)樣A反應(yīng)樣；向供試品反應(yīng)樣和目標(biāo)樣A反應(yīng)樣中分別加入酶標(biāo)抗體，然后加入底物液進(jìn)行顯色反應(yīng)，并測出OD值；以及根據(jù)供試品反應(yīng)樣和目標(biāo)樣A反應(yīng)樣中得到的OD值計算出對應(yīng)的多糖含量，從而計算出吸附率，本發(fā)明具有計算出疫苗中各個血清型的結(jié)合原液的吸附率，并通過吸附率得出各型結(jié)合原液免疫原性的優(yōu)點。