摘要： 原癌基因c-myc被鑒定為J亞群禽白血病病毒(ALV-J)誘導髓樣細胞瘤的常見整合位點,其異常激活可能是ALV-J最重要的分子致病機制。為了鑒定c-myc反義RNA對c-myc基因表達的影響及其在ALV-J增殖中的作用,本研究通過cDNA末端快速擴增(RACE)技術、PCR擴增5’-race和3’-race后對其編碼屬性的分析鑒定結果顯示,雞c-myc原癌基因反義RNA全長621 bp,且不編碼蛋白;該反義RNA序列定位于雞2號染色體,且源自c-myc外顯子3反向序列,因此將其命名為ch-MYC-AS1。將ch-MYC-AS1連接載體pcDNA3.1,構建真核表達質粒pcDNA3.1-ch-MYC-AS1,將其轉染至雞巨噬細胞細胞系HD11,培養(yǎng)48 h后利用熒光定量PCR和western blot檢測ch-MYC-AS1過表達對c-myc表達的影響,結果顯示,過表達ch-MYC-AS1可以顯著抑制c-myc原癌基因在HD11中的表達。以MOI 5的ALV-J(JS09GY3株)感染HD11細胞4 h后,將pcDNA3.1-ch-MYC-AS1質粒轉染該細胞,48 h后采用IDEXX禽白血病抗原檢測試劑盒檢測細胞上清中ALV-J p27蛋白的表達水平,結果顯示過表達ch-MYC-S1顯著減少細胞上清中ALV-J p27蛋白的表達;進一步通過熒光定量PCR、western blot檢測過表達ch-MYC-AS1對ALV-J復制的影響,結果顯示,ALV-J env基因mRNA轉錄水平和蛋白表達水平在ch-MYC-AS1轉染后48 h的HD11細胞中均顯著下調(P<0.01);利用間接免疫熒光技術檢測DF-1細胞上清中ALV-J的病毒效價,結果顯示:與對照組相比,HD11細胞上清中ALV-J的病毒效價在ch-MYC-AS1轉染后48 h明顯降低。上述結果表明過表達ch-MYC-AS1可以顯著抑制ALV-J在HD11細胞中的增殖。本研究首次揭示了原癌基因c-myc反義RNA的抗病毒功能,為進一步探究c-myc基因在ALV-J致病機理中的作用提供了參考依據(jù)。

摘要： 一、主要成分與含量二、作用與用途用于檢測蛋清、泄殖腔棉拭子(胎糞)和細胞分離病毒上清中的禽白血病病毒p27抗原。三、用法與判定1.用法(1)洗滌液的配制使用前,將濃縮的洗滌液恢復至室溫(20°C-25°C),并搖動使結晶溶解,然后用超純水作10倍稀釋(例如:每板用40ml濃縮液加上360ml水),即1x洗滌液。

摘要： 禽白血病是危害珍珠雞的重要疾病之一,病原為禽白血病病毒(ALVs),其侵入宿主后,可見明顯的腫瘤癥狀,并引起采食下降、精神不振等非特異性癥狀,同時,由于免疫器官受到侵害,珍珠雞抵抗力下降,造成珍珠雞疫苗免疫應答失敗。通過對禽類白血病病毒特征和禽白血病病毒的致病性進行概述,提出了圈養(yǎng)狀態(tài)下珍珠雞白血病的防控方法,以供參考。

摘要： 從湖南某烏骨雞種雞場采集病雞病料,通過臨床癥狀、病理變化觀察,以及ELISA及RT-PCR方法進行禽白血病病毒的檢測,結果表明該樣品中ALV p27抗原陽性,經(jīng)RT-PCR檢測為ALV感染,病理變化可見肝臟出現(xiàn)明顯灰白結節(jié)或彌散病灶,組織學可見成淋巴細胞浸潤,診斷為ALV感染所致的淋巴細胞性白血病。

摘要： 禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(avian leucosis virus,ALV)引起的一種禽類重要免疫抑制性疾病,主要以垂直方式傳播,給我國養(yǎng)禽業(yè)造成了嚴重經(jīng)濟損失。目前控制ALV傳播的最有效手段是凈化,而檢測技術是實現(xiàn)凈化的重要技術支撐。本文從病原學、病理學、血清學、分子生物學等方面對ALV檢測技術進行綜述,概述了不同檢測技術的研究進展情況,分析了其優(yōu)缺點和應用條件。隨著新技術的發(fā)展和完善,各種ALV檢測技術得到了不斷優(yōu)化、改進和發(fā)展。本文有助于充分了解現(xiàn)有的ALV檢測技術,對日常檢測中不同檢測技術的綜合考量、選擇或優(yōu)化組合具有借鑒意義,為提高ALV檢出率,縮短凈化時間,提高工作效率提供了技術支撐。

摘要： 為了解和評估現(xiàn)有雞馬立克病(MD)疫苗的質量,采用間接免疫熒光試驗(IFA)對2020—2021年市場銷售的9家不同企業(yè)生產(chǎn)的11個批次MD疫苗產(chǎn)品進行病毒效價測定和對比分析,同時用ELISA試劑盒、膠體金試紙條或RT-PCR方法分別對禽白血病病毒(ALV)和禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)的污染狀況進行檢測。結果表明,在所檢測的MD液氮苗中,3批進口或國產(chǎn)的CVI988單價液氮苗之間病毒效價無顯著差異,2批不同品牌814單價液氮苗效價差異顯著(P<0.05),2批不同品牌雙價液氮苗(CVI988+HVT或814+HVT)病毒效價差異極顯著(P<0.01),但上述全部類型液氮苗產(chǎn)品的病毒效價均大于5 500 PFU/羽份,達到國標規(guī)定值2倍以上。然而,4批不同品牌HVT凍干苗的病毒效價均遠低于產(chǎn)品說明書標注的2 000 PFU/羽份,僅為83.90~109.50 PFU/羽份。全部MD疫苗產(chǎn)品的ALV和REV檢測結果均為陰性,表明這些產(chǎn)品潔凈無污染。

摘要： E亞群禽白血病病毒(ALV-E)是指存在于雞染色體中的內(nèi)源性逆轉錄病毒基因組DNA或片段。具有轉錄活性的ALV-E既會對雞的生產(chǎn)性能(體重和產(chǎn)蛋率)產(chǎn)生負面影響,又能從抗體水平干擾對外源性ALV的鑒別診斷。為對黑龍江省某雞場內(nèi)一禽白血病病毒RT-PCR陽性病料進行病毒分離鑒定及分析其基因組特征和遺傳進化情況,通過分子生物學、病毒形態(tài)學及全基因組序列測定方法對病毒培養(yǎng)物進行鑒定和分析,結果顯示,該分離株可在CEF細胞盲傳至第9代,電鏡下可觀察到近似球形、直徑約為80 nm,并具有囊膜和纖突結構的病毒粒子,將其命名為HLJE2020株。序列分析結果顯示,其全基因組序列中的gag和pol基因相對保守,LTR和env基因與ALV-E同屬一個進化分支,而gp85基因則與ALV-E和ALV-B均具有較高相似性,遺傳進化分析顯示在ALV-E和ALV-B間出現(xiàn)一個單獨的分支,結合RDPv.4和SimPlot軟件分析結果,推測該毒株gp85基因可能存在E亞群AF229株與B亞群SDAU09C1株的重組現(xiàn)象。本研究為了解禽白血病病毒基因組遺傳演化情況提供數(shù)據(jù)資料,并為ALV的防控提供參考和依據(jù)。

摘要： 根據(jù)GenBank中收錄的雞毒支原體、禽白血病病毒和網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生癥病毒的基因序列,分別設計并合成了引物和相應的熒光探針,通過對反應條件和反應程序的優(yōu)化,建立了一種可以同時檢測3種禽用疫苗外源性病原污染因子的三重熒光PCR檢測方法.結果 顯示,建立的三重熒光PCR靈敏度高,最低可檢測到10 copies/μL的質粒,并具有良好的特異性,可用于禽用疫苗外源性污染因子的快速檢測,也可用于相關疫病的診斷.

摘要： 根據(jù)GenBank中收錄的雞毒支原體、禽白血病病毒和網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生癥病毒的基因序列,分別設計并合成了引物和相應的熒光探針,通過對反應條件和反應程序的優(yōu)化,建立了一種可以同時檢測3種禽用疫苗外源性病原污染因子的三重熒光PCR檢測方法。結果顯示,建立的三重熒光PCR靈敏度高,最低可檢測到10 copies/μL的質粒,并具有良好的特異性,可用于禽用疫苗外源性污染因子的快速檢測,也可用于相關疫病的診斷。

摘要： 在對種雞群實施禽白血病凈化過程中,檢測并淘汰感染公雞對推進凈化極其重要,然而對于以血液病毒分離為準還是以精液病毒分離為準還缺乏準確的參考數(shù)據(jù).為此,本研究對中國正在實施禽白血病凈化的4個不同品系的種公雞群同時采集血液和精液分別實施病毒分離,并對其中某蛋雞場公雞通過這兩種方式分離的病毒進行了gp85基因擴增并分析其同源性與遺傳進化關系.病毒分離結果顯示,4個雞群采用血液分離禽白血病病毒(ALV)的陽性率分別為15.51％(188/1212)、3.25％(13/400)、4％(4/100)和2.5％(5/200);采用精液分離ALV的陽性率分別為3.71％(45/1212)、2.75％(11/400)、2％(2/100)和1.5％(3/200);而兩種病毒分離結果同時為陽性的公雞分別有16只、8只、1只和2只.結果表明,血液病毒分離和精液病毒分離結果不完全一致,后者較前者ALV分離的陽性率總體要低.序列同源性分析結果顯示,該蛋雞場陽性公雞經(jīng)血液和精液兩種方式分離ALV的gp85基因序列(分別為11與9條基因序列)的同源性高達99.0％～100％,所有分離株均與ALV-A亞群參考株同源性為88.6％～99.2％,而與其他各亞群參考株的同源性僅為50.0％～89.6％.遺傳進化分析也表明分離株均屬于A亞群,表明該蛋雞場主要以ALV-A亞群感染為主.上述結果提示在禽白血病凈化過程中,應對公雞分別采用血液和精液兩種病毒分離方法,任何一種病毒分離結果為陽性的公雞均應被淘汰.本研究為完善現(xiàn)有禽白血病凈化技術方案提供了數(shù)據(jù)支持,有助于加速種公雞禽白血病的凈化進程.

摘要： 禽白血病(Avian leukosis,AL)是由隸屬反轉錄病毒科腫瘤病毒屬的禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的禽類多種傳染性腫瘤病,是危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的主要傳染病之一.該病的種類繁多,大部分侵害禽類造血器官,少數(shù)破壞其他組織,其中以淋巴細胞白血病最為常見.ALV基因組由env、gag和pol3種基因組成,其中env基因被證實與抗原性、毒力和組織親嗜性有關,具有亞群特異性.為了解ALV貴州流行株的env基因分子特征,研究env基因的變異規(guī)律,本試驗通過克隆測序獲得ALV貴州流行株env基因序列,并進行核苷酸序列同源性和系統(tǒng)進化分析,明確貴州省禽白血病病原遺傳變異情況.

摘要： 為建立一種方便快捷的檢測疫苗中外源性禽白血病病毒的RT-PCR方法,本研究根據(jù)A亞群標準株RAV-1(DQ365814)和B亞群RAV-2(K02374)的env基因保守序列,設計1對引物,對外源性ALV(A亞群和B亞群)進行擴增,通過優(yōu)化建立了外源性禽白血病病毒(ALV)的RT-PCR檢測方法,同時對該方法進行了特異性、敏感性和重復性檢測.結果顯示,本研究建立的RT-PCR方法敏感性高,最低檢測限1.628pg,擴增產(chǎn)物的特異性良好,重復性良好.研究表明,本試驗建立的RT-PCR方法快速、特異、敏感,可用于禽類活疫苗中禽白血病病毒的快速檢測.

摘要： 目的：建立一種檢測禽白血病病毒衣殼蛋白p27(ALV-p27)基因絕對熒光定量PCR的方法.方法：設計ALV-p27特異性熒光定量PCR引物擴增基因并制備質粒標準品,同時建立檢測ALV-p27的絕對熒光定量PCR方法.利用建立的絕對定量PCR方法檢測病毒感染一日齡雛雞不同組織臟器中p27基因的分布和表達情況.結果：成功建立了檢測ALV-p27基因絕對熒光定量PCR的方法.一日齡雛雞組織臟器中,ALV-p27基因在腦組織中表達水平最高,而在胸腺組織中表達水平最低.結論：本研究建立的檢測ALV-p27基因絕對定量PCR的方法為進一步研究ALV-p27的生物學功能提供了一種技術手段.

摘要： 為了快速、準確檢測食源生物制品中的禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV),根據(jù)GenBank中登錄的REV參考毒株LTR基因序列和ALV基因序列,設計合成2對特異性引物,在建立各病毒單項PCR檢測技術的基礎上,優(yōu)化反應條件.建立2種病毒的雙重PCR檢測方法結果:可同時擴增REV的467bp和ALV的675的特異性片段,面對其他5種禽病病原的PCR擴增結果均為明性.敏感性測定結果表明,該雙重PCR技術能檢出10Pg的ALV和10pg的REC模板.甩雙重PCR技術與REV的間接免疫熒光法及ALV ELISA 對245份疫苗株檢測,進行同步比較,結果總符合率為100％.表明建立的雙重 PCR檢測方洼,具有特務、快速、準確的特點.這2種外源病毒的同時檢測,顯示出了較好的可行性.

摘要： 根據(jù)NCBI收錄的雞傳染性貧血病毒、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒與禽白血病病毒A、C、D亞群參考毒株的序列,設計合成特異性擴增引物及探針,將下游引物進行cy3熒光標記,制備基因芯片;分別提取幾種病毒的基因組DNA,進行PCR擴增后與探針進行雜交,熒光檢測儀掃描并分析結果.結果表明:制備的芯片能夠同時檢測雞傳染性貧血病毒、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒與禽白血病病毒A、C、D亞群,具有較高的特異性和靈敏度;為今后在臨床應用中快速鑒別診斷雞傳染性貧血病毒、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒與禽白血病病毒A、C、D亞群提供可行性.

摘要： 本文通過對地方特色蛋雞配套系親本進行試驗研究，通過DF1細胞培養(yǎng)，從配套系親本雞群中分離鑒定出3株外源性禽白血病病毒命名為JSI2JDO1,JS12JD02(母本)和JS12JD03(父本)。采用抗ALV-Jgp85特異性單抗JE9進行亞群特異性免疫熒光試驗，結果顯示JS12JD03能與J亞群特異單抗反應，在熒光顯微鏡下產(chǎn)生綠色熒光，而母本分離株JS 12JD01和JS12JD02株不能與JE9單抗反應。通過PCR擴增其囊膜蛋白基因，測序后與GenBank中已發(fā)表的不同亞群ALV參考株囊膜蛋白gp85的氨基酸序列同源性比較，結果顯示JS12JD01株與A亞群參考株的gp85氨基酸序列同源性較高，在88.7%-99.1%之間，與B,C,D,E和J亞群參考株同源性僅在32.5%-82.8%之間;JS12JD02分離株與B亞群參考株的gp85氨基酸序列同源性較高，在92.4-96:8%之間，與A,C,D，E和J亞群參考株的同源性僅在34.6%-88.7%之間。父本分離株JS12JD03gp85氨基酸序列與5株J亞群參考株同源性較高，在88.6%-90.5%之間，與A,C,D,E和J亞群參考株的同源性僅在34.6%-37.3%之間。表明母本分離株分別屬于A,B兩個不同亞群，父本分離株屬于J亞群。

摘要： 本文為建立一種快速有效的檢測禽白血病病毒的方法,以原核表達的HLJ09MDJ-1(ALV-J)p27蛋白制備的單克隆抗體作為包被抗體,p27蛋白制備的多克隆抗體作為檢測抗體建立了檢測ALV的雙抗體夾心ELISA(DAS-ELISA)方法.該方法對p27的最小檢出量為1.25ng/ML,且與禽類常見的病毒(IBV,MDV,ILTV等)無交叉反應.動物感染實驗結果表明該方法可在感染動物12天后有效檢測泄殖腔分泌物中的ALV.利用該方法檢測了491份蛋清樣品和180份肛拭子樣品,與PCR方法符合率分別為96.5％和93.8％.結果表明,該方法具有方便、快速、敏感等優(yōu)點,該方法的建立為ALV的早期診斷及種雞場的凈化提供了有效工具.

摘要： 禽白血病病毒主要引起雞腫瘤性病變,對養(yǎng)禽業(yè)造成重大經(jīng)濟損失,是我國《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012-2020年)》中種雞場重點疫病凈化考核標準.了解對禽白血病病毒特征及不同亞群分類,掌握檢測方法,跟蹤2016年已報道的禽白血病流行情況,對目前我國禽白血病凈化工作有重要意義.

摘要： 根椐GenBank中已發(fā)表的禽呼腸孤病毒(ARV)、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)等3種病毒基因組序列,設計了3對分別與ARV、REV和ALV某段基因序列互補的引物.在建立各病毒單項RTPCR技術的基礎上,優(yōu)化三重RT-PCR反應條件,建立了3種病毒的三重RT-PCR技術.結果表明,用這3對引物對同一樣品中的ARV、REV、ALV核酸模板進行三重RT-PCR擴增,可同時擴增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特異性片段,而對其他6種禽病病原的PCR擴增結果均為陰性.敏感性測定結果表明,該三重RT-PCR技術能檢出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板.用42份臨床病料對本研究多重RT-PCR技術和單項RT-PCR技術進行對比驗證,結果顯示,兩者的總符合率為92％以上.表明建立的多重RT-PCR檢測方法,具有特異、快速、準確的特點,可用于對這3種病毒的同時檢測和鑒別診斷.

摘要： 本文將病毒分離與抗原抗體檢測相結合,同時注意生物安全措施的落實,確保陰性雞只不受任何外源ALV感染,對地方特色蛋雞配套系雞群進行了ALV凈化的研究,并取得了良好的成效,為地方品系雞群中ALV凈化工作的開展提供參考依據(jù)。經(jīng)過一個世代的凈化更替，配套系ALV陽性率顯著下降，父本群在第二世代25周齡時，泄殖腔棉拭p27抗原陽性率由自繁前的23.4%下降到7.1%,J亞群抗體陽性率由自繁前的21.3%下降到8.3%，病毒分離陽性率由自繁前的7.1%下降到3.2%;母本群在第二世代25周齡時，泄殖腔棉拭p27抗原陽性率由自繁前的40.7%下降到9.7%,A/B亞群抗體陽性率由自繁前的7.2%下降到3.8%，病毒分離陽性率由自繁前的9.1%下降到2.7%;配套系親本雞群所產(chǎn)的商品代ALV陽性率也明顯低于上一世代，25周齡時p27抗原陽性率由23.5%下降到5.2%,AB亞群抗體陽性率由12.8%下降到2.5%,J亞群抗體陽性率由17.7%下降到3.1%，病毒分離陽性率由7.3%下降到2.9%,達到一定程度的凈化。

摘要： 本發(fā)明提供包含以及體內(nèi)或體外表達引發(fā)動物或人的抗FeLV的免疫應答的FeLV抗原的載體，包含所述載體和/或FeLV多肽的組合物，抗FeLV免疫接種的方法和用于與這樣的方法和組合物一起使用的試劑盒。

摘要： 本發(fā)明提供包含以及體內(nèi)或體外表達引發(fā)動物或人的抗FeLV的免疫應答的FeLV抗原的載體，包含所述載體和/或FeLV多肽的組合物，抗FeLV免疫接種的方法和用于與這樣的方法和組合物一起使用的試劑盒。

摘要： 本發(fā)明公開一種一步法快速檢測禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒REV和J亞群禽白血病病毒ALV-J的試紙條，包括不吸水的支撐層、附著在支撐層上的吸附層，吸附層由樣品吸附纖維層、金標抗體纖維層、纖維素膜層及吸水層依次拼接而成；纖維素膜層上標記有抗羊IgG或抗小鼠IgG的對照印跡，以及含有抗REV和抗ALV-J的抗體檢測印跡；所述抗REV和抗ALV-J的抗體為抗REV和抗ALV-J的單克隆抗體或多克隆抗體；金標抗體纖維層上附著有與檢測印跡對應的以膠體金標記的抗REV和抗ALV-J的混合多克隆抗體或單克隆抗體。該試紙條檢測的特異性強、敏感性高，操作簡便，檢測快速，結果直觀，適用于REV和ALV-J病毒的現(xiàn)場快速聯(lián)合檢測，亦可用于兩種病毒的單獨感染或混合感染的鑒別診斷。該試紙條使用范圍廣，便于推廣應用。

摘要： 本發(fā)明公開了一種表達J亞群禽白血病病毒(ALV?J)Gag和Env基因的重組雞馬立克氏病病毒疫苗株及其構建方法和應用，屬于醫(yī)學或獸醫(yī)學技術領域。本發(fā)明利用重組克隆技術，將包含ALV?J Gag和Env基因以及CAG啟動子序列的基因片段CAG?ALVGE插入到雞馬立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因內(nèi)部，構建獲得在US2基因內(nèi)部插入CAG?ALVGE表達框的重組粘粒，由其拯救獲得表達ALV?J Gag和Env基因的重組雞馬立克氏病病毒疫苗株。研究表明，本發(fā)明獲得的疫苗株具有與親本毒814疫苗株同等的體外復制能力以及良好的遺傳穩(wěn)定性，并且能夠同時抵抗MDV超強毒株以及ALV?J超強毒株的攻擊。由此可見，本發(fā)明獲得的表達ALV?J Gag和Env基因的重組MDV疫苗株可以用于制備預防或治療禽白血病和雞馬立克氏病的藥物。

摘要： 本發(fā)明公開一種一步法快速檢測馬立克氏病病毒MDV和J亞群禽白血病病毒ALV-J的試紙條，包括不吸水的支撐層、附著在支撐層上的吸附層，吸附層由樣品吸附纖維層、金標抗體纖維層、纖維素膜層及吸水層依次拼接而成；纖維素膜層上標記有抗羊IgG或抗小鼠IgG的對照印跡，以及含有抗MDV和抗ALV-J的抗體檢測印跡；所述抗MDV和抗ALV-J的抗體為抗MDV和抗ALV-J的單克隆抗體或多克隆抗體；金標抗體纖維層上附著有與檢測印跡對應的以膠體金標記的抗MDV和抗ALV-J的混合多克隆抗體或單克隆抗體。該試紙條檢測的特異性強、敏感性高，操作簡便，檢測快速，結果直觀，適用于MDV和ALV-J病毒的現(xiàn)場快速聯(lián)合檢測，亦可用于兩種病毒的單獨感染或混合感染的鑒別診斷。該試紙條使用范圍廣，便于推廣應用。

摘要： 本發(fā)明公開一種一步法快速檢測禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒REV和J亞群禽白血病病毒ALV-J的試紙條，包括不吸水的支撐層、附著在支撐層上的吸附層，吸附層由樣品吸附纖維層、金標抗體纖維層、纖維素膜層及吸水層依次拼接而成；纖維素膜層上標記有抗羊IgG或抗小鼠IgG的對照印跡，以及含有抗REV和抗ALV-J的抗體檢測印跡；所述抗REV和抗ALV-J的抗體為抗REV和抗ALV-J的單克隆抗體或多克隆抗體；金標抗體纖維層上附著有與檢測印跡對應的以膠體金標記的抗REV和抗ALV-J的混合多克隆抗體或單克隆抗體。該試紙條檢測的特異性強、敏感性高，操作簡便，檢測快速，結果直觀，適用于REV和ALV-J病毒的現(xiàn)場快速聯(lián)合檢測，亦可用于兩種病毒的單獨感染或混合感染的鑒別診斷。該試紙條使用范圍廣，便于推廣應用。

摘要： 本發(fā)明公開了二重熒光LAMP區(qū)分馬立克氏病病毒和J亞群禽白血病病毒檢測引物組，包括引物1至引物14，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14的堿基序列，其中引物7與引物1互補的探針、引物14為與引物8互補的探針，它們使擴增反應具有很高的特異性，能分別與MDV meq基因和ALV?J gp85基因結合，反應后在不同波長的熒光下發(fā)出不同顏色的熒光，從而實現(xiàn)快速敏感特異的鑒別MDV和ALV?J。據(jù)此，還研制了相應試劑盒并建立相應LAMP方法?？傊景l(fā)明具有特異性強、靈敏度高、快速簡便的特點，適合在基層獸醫(yī)站和具備基本實驗儀器的養(yǎng)殖場中快速檢測，具有較好的應用前景。

摘要： 本發(fā)明公開了一種表達J亞群禽白血病病毒(ALV-J)Gag和Env基因的重組雞馬立克氏病病毒疫苗株及其構建方法和應用，屬于醫(yī)學或獸醫(yī)學技術領域。本發(fā)明利用重組克隆技術，將包含ALV-J Gag和Env基因以及CAG啟動子序列的基因片段CAG-ALVGE插入到雞馬立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因內(nèi)部，構建獲得在US2基因內(nèi)部插入CAG-ALVGE表達框的重組粘粒，由其拯救獲得表達ALV-J Gag和Env基因的重組雞馬立克氏病病毒疫苗株。研究表明，本發(fā)明獲得的疫苗株具有與親本毒814疫苗株同等的體外復制能力以及良好的遺傳穩(wěn)定性，并且能夠同時抵抗MDV超強毒株以及ALV-J超強毒株的攻擊。由此可見，本發(fā)明獲得的表達ALV-J Gag和Env基因的重組MDV疫苗株可以用于制備預防或治療禽白血病和雞馬立克氏病的藥物。

摘要： 本發(fā)明公開一種一步法快速檢測馬立克氏病病毒MDV和J亞群禽白血病病毒ALV-J的試紙條，包括不吸水的支撐層、附著在支撐層上的吸附層，吸附層由樣品吸附纖維層、金標抗體纖維層、纖維素膜層及吸水層依次拼接而成；纖維素膜層上標記有抗羊IgG或抗小鼠IgG的對照印跡，以及含有抗MDV和抗ALV-J的抗體檢測印跡；所述抗MDV和抗ALV-J的抗體為抗MDV和抗ALV-J的單克隆抗體或多克隆抗體；金標抗體纖維層上附著有與檢測印跡對應的以膠體金標記的抗MDV和抗ALV-J的混合多克隆抗體或單克隆抗體。該試紙條檢測的特異性強、敏感性高，操作簡便，檢測快速，結果直觀，適用于MDV和ALV-J病毒的現(xiàn)場快速聯(lián)合檢測，亦可用于兩種病毒的單獨感染或混合感染的鑒別診斷。該試紙條使用范圍廣，便于推廣應用。

摘要： 本發(fā)明公開了二重熒光LAMP區(qū)分網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒和J亞群禽白血病病毒檢測引物組，包括引物1至引物14，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14的堿基序列，其中引物7為與引物1互補的探針、引物14為與引物8互補的探針，它們使擴增反應具有很高特異性，能分別與REV gp90基因和ALV?J gp85基因結合，反應后在不同波長熒光下發(fā)出不同顏色熒光，從而實現(xiàn)快速敏感特異地鑒別REV和ALV?J。據(jù)此，還研制了相應試劑盒并建立相應LAMP方法。總之，本發(fā)明特異性強、靈敏度高、快速簡的特點，適合在基層獸醫(yī)站和具備基本實驗儀器的養(yǎng)殖場中進行快速檢測，具有較好的應用前景。