摘要:
目的探討鹿茸通過磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信號通路對內皮祖細胞(EPCs)活性及其細胞遷移的作用機制。方法將大鼠分為8組:空白組、模型組、鹿茸低劑量組、鹿茸中劑量組、鹿茸高劑量組、LY294002+鹿茸低劑量組、LY294002+鹿茸中劑量組、LY294002+鹿茸高劑量組。采用動脈分支分離法+維生素D3注射聯合高脂喂養(yǎng)法建立下肢動脈硬化閉塞大鼠模型。鹿茸低劑量組、中劑量組、高劑量組分別給予相應劑量鹿茸灌胃給藥,空白組、模型組給予等容量蒸餾水灌胃,LY294002+鹿茸低劑量組、LY294002+鹿茸中劑量組、LY294002+鹿茸高劑量組先行腹腔注射LY2940021 mg/(kg·d),再給予相應劑量鹿茸灌胃,連續(xù)干預28 d。流式細胞術檢測外周血和骨髓中EPCs的CD133陽性細胞(CD133+)比例;酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測大鼠外周血EPCs中血管內皮生長因子(VEGF)、基質細胞衍生因子-1α(SDF-1α)水平;免疫熒光法檢測大鼠腓腸肌中內皮型一氧化氮合酶(eNOS)、趨化因子受體4(CXCR4)陽性細胞的表達比例;蛋白質印跡(Western Blotting)法檢測PI3K、Akt蛋白表達水平。結果與空白組比較,模型組及給藥組骨髓與外周血中CD133+細胞比例升高;與模型組比較,各給藥組CD133+細胞比例均降低,其中,鹿茸高劑量組高于LY294002+鹿茸高劑量組,LY294002+鹿茸高劑量組高于鹿茸中劑量組,鹿茸中劑量組高于LY294002+鹿茸中劑量組,LY294002+鹿茸中劑量組高于鹿茸低劑量組,鹿茸低劑量組高于LY294002+鹿茸低劑量組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。模型組及給藥組VEGF、SDF-1α水平及eNOS、CXCR4陽性表達比例均較空白組降低,各給藥組VEGF、SDF-1α水平及eNOS、CXCR4陽性表達比例均高于模型組,鹿茸高劑量組高于LY294002+鹿茸高劑量組,LY294002+鹿茸高劑量組高于鹿茸中劑量組,鹿茸中劑量組高于LY294002+鹿茸中劑量組,LY294002+鹿茸中劑量組高于鹿茸低劑量組,鹿茸低劑量組高于LY294002+鹿茸低劑量組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。與模型組比較,各給藥組PI3K、Akt蛋白表達水平升高(P<0.05);與各抑制劑組比較,各給藥組PI3K、Akt蛋白表達水平升高(P<0.05)。結論鹿茸具有促進內皮細胞增殖、遷移及改善內皮細胞功能的作用,其通過激活PI3K/Akt信號通路調控EPCs的動員及歸巢促進下肢動脈硬化閉塞癥大鼠的血管新生。