摘要： 為篩選對(duì)虹鱒(Oncorhynchus mykiss)有潛在益生效果的菌株,本研究從健康虹鱒幼魚(yú)腸道中分離到1株潛在益生菌株RT-BS07,采用形態(tài)學(xué)觀察和分子特征分析對(duì)該菌株進(jìn)行了鑒定,并評(píng)價(jià)了該菌株的抑菌性、耐受性、黏附性和安全性.形態(tài)學(xué)觀察顯示,菌株RT-BS07為革蘭氏陽(yáng)性桿菌,有圓形或橢圓形芽孢.16S rRNA比對(duì)結(jié)果顯示,該菌株與枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)NCBI3610株的同源性為99.86％.結(jié)合16S rRNA基因序列分析和形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果,確定菌株RT-BS07為枯草芽孢桿菌.菌株RT-BS07具備產(chǎn)蛋白酶和纖維素酶能力,其酶活力分別為(0.039±0.002)和(0.393±0.002)U/mg;該菌株可有效抑制溫和氣單胞菌(Aeromonas sobria)、殺鮭氣單胞菌(A.salmonicida)和魯氏耶爾森氏菌(Yersinia ruckeri)等致病菌.菌株RT-BS07在pH為2～10 LB液體培養(yǎng)基中均可存活;在鹽度為2％ ～8％ 條件下存活率為5.70％ ～93.28％,其存活率隨鹽度升高而降低.體外黏附試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株RT-BS07可大量黏附在虹鱒前腸黏膜,不破壞腸道組織完整性,對(duì)左氟沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星和鏈霉素等18種抗菌藥物敏感.本研究分離篩選得到的枯草芽孢桿菌RT-BS07株具有產(chǎn)消化酶性能,其抗逆性能強(qiáng),對(duì)虹鱒無(wú)毒害作用,可作為虹鱒健康養(yǎng)殖及益生菌制劑研發(fā)源益生菌候選株.

摘要： 本文研究了MS-222麻醉劑在虹鱒肌肉中殘留的高效液相色譜-紫外(HPLC-UV)檢測(cè)分析方法。虹鱒肌肉組織勻漿后置于Mcllvaine緩沖液與甲醇的混合提取液中超聲提取,提取液濃縮溶解后經(jīng)C_(18)固相萃取柱純化;純化定容樣品以甲醇∶水∶乙酸=65∶35∶1為流動(dòng)相,利用C_(18)色譜柱行等梯度洗脫分離,用紫外線檢測(cè)器于223 nm波長(zhǎng)處進(jìn)行檢測(cè)。MS-222的HPLC出峰時(shí)間為6.1 min左右,方法檢測(cè)限為20μg/kg,精密度在2.63%~4.74%之間;MS-222加標(biāo)回收率均﹥88%,批內(nèi)變異系數(shù)<1.2%,批間變異系數(shù)均<5%,方法的重復(fù)性和重現(xiàn)性好。該方法具有操作便捷、提取率高、重復(fù)性和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn),具備良好的檢測(cè)特異性和精密度,滿足一般MS-222殘留分析的需要,可為進(jìn)一步研究MS-222在虹鱒體內(nèi)的殘留及其代謝規(guī)律提供技術(shù)支持。

摘要： 虹鱒屬于一種冷水性養(yǎng)殖魚(yú)類,其具備肉質(zhì)細(xì)嫩、營(yíng)養(yǎng)豐富的特點(diǎn),不僅生長(zhǎng)速度快,而且易于進(jìn)行人工繁殖。為此,本文介紹了虹鱒的生物學(xué)特征;從親魚(yú)培育、人工授精、孵化受精卵、培育魚(yú)種等方面簡(jiǎn)述了虹鱒人工繁殖的技術(shù)要點(diǎn);指出了虹鱒養(yǎng)殖存在的主要問(wèn)題:養(yǎng)殖技術(shù)難度高,活餌料滿足難度大,資金投入缺口大;提出了虹鱒養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的策略:加大技術(shù)交流力度,加大資源整合力度,擴(kuò)大虹鱒養(yǎng)殖規(guī)模,加強(qiáng)技術(shù)培訓(xùn)工作。

摘要： 【目的】為提高虹鱒源枯草芽孢桿菌益生菌候選株RT-BS07胞外蛋白分泌能力,對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,并對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物抑菌特性進(jìn)行比較分析?！痉椒ā恳圆煌囵B(yǎng)條件下RT-BS07株產(chǎn)胞外蛋白濃度為指標(biāo),結(jié)合單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,并測(cè)定不同發(fā)酵條件下胞外蛋白對(duì)嗜水氣單胞菌等5種水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中常見(jiàn)條件致病菌的抑菌活性。【結(jié)果】初始pH值為7.0,鹽度3%的LB培養(yǎng)基,33°C下振蕩培養(yǎng)36 h,空氣浴搖床轉(zhuǎn)速150 r/min為菌株最佳蛋白分泌的發(fā)酵條件,在此條件下菌株胞外蛋白濃度可達(dá)(22.91±0.91)mg/mL,顯著高于常規(guī)培養(yǎng)下的(12.74±0.26)mg/mL(鹽度1%、初始pH值7.0,搖床轉(zhuǎn)速120 r/min、28°C下培養(yǎng)24 h)。該胞外蛋白對(duì)魯氏耶爾森菌、維氏氣單胞菌、嗜水氣單胞菌等水產(chǎn)常見(jiàn)條件致病菌具有較好的抑菌效果,抑菌面積分別為(13.87±1.03)mm^(2)、(11.78±0.46)mm^(2)、(7.93±0.21)mm^(2)?！窘Y(jié)論】枯草芽孢桿菌RT-BS07株可分泌具有較強(qiáng)抑菌性能的胞外蛋白,并可通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵條件顯著增加蛋白產(chǎn)量。試驗(yàn)結(jié)果將為虹鱒養(yǎng)殖過(guò)程中常見(jiàn)條件致病菌的生物綠色防治及抗菌制劑的研發(fā)應(yīng)用提供實(shí)踐數(shù)據(jù)和理論參考。

摘要： 【目的】研究復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒(Oncorhynchus mykiss)肝臟免疫功能及腸道免疫相關(guān)基因的影響。【方法】將紅棗提取物、山藥提取物和黃芪提取物按照質(zhì)量比1∶1∶1混合,分別按質(zhì)量分?jǐn)?shù)0(對(duì)照)、0.3%、0.6%和1.2%添加到虹鱒基礎(chǔ)飼料中,飼喂體長(zhǎng)7.6~8.9 cm的虹鱒幼魚(yú)56 d。用副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)對(duì)幼魚(yú)進(jìn)行攻毒試驗(yàn)(5.48×10^(6) cfu/尾),4 d后,取其肝臟和腸道,測(cè)定肝臟的生理生化指標(biāo),用半定量PCR及熒光定量PCR測(cè)定腸道免疫相關(guān)基因的表達(dá)。【結(jié)果】與對(duì)照組比較,肝臟的總抗氧化能力(T-AOC)顯著升高(P0.05);各復(fù)方中草藥組腸道的腫瘤壞死因子(TNF-α)及1.2%劑量組轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)轉(zhuǎn)錄水平極顯著降低(P<0.01),0.3%和0.6%劑量組的補(bǔ)體3(C3)轉(zhuǎn)錄水平顯著升高(P<0.05)。【結(jié)論】復(fù)方中草藥(紅棗+山藥+黃芪)可提高感染副溶血弧菌的虹鱒非特異性免疫功能。

摘要： 魚(yú)類的體型、游泳速度及耐流能力是其長(zhǎng)期適應(yīng)外界水生環(huán)境的進(jìn)化結(jié)果。魚(yú)在游動(dòng)或水流作用下,魚(yú)體與流體會(huì)產(chǎn)生復(fù)雜的相互作用,導(dǎo)致其消耗大量能量,對(duì)其生存和生長(zhǎng)具有重要影響。本研究以虹鱒(Oncorhynchus mykiss)為研究對(duì)象,構(gòu)建基于實(shí)物尺寸的三維數(shù)值模型,通過(guò)3D打印制作實(shí)物模型,利用水槽試驗(yàn)和數(shù)值模擬方法研究其水動(dòng)力學(xué)特性。結(jié)果顯示,在雷諾數(shù)1.6×10^(5)~5.8×10^(5)區(qū)間內(nèi),沖角0°~45°范圍內(nèi)魚(yú)體阻力系數(shù)C_(x)隨沖角增大從0.027增大至0.599,呈指數(shù)增長(zhǎng)趨勢(shì),側(cè)向力系數(shù)C_(y)隨沖角增加呈現(xiàn)線性增長(zhǎng)趨勢(shì),最大達(dá)到了0.71;沖角和魚(yú)體結(jié)構(gòu)曲率對(duì)魚(yú)體周圍的流速分布具有協(xié)同影響,隨著沖角的增大,速度場(chǎng)中高流速區(qū)和低流速區(qū)呈現(xiàn)一定的移動(dòng)規(guī)律。魚(yú)體結(jié)構(gòu)與表面的壓力分布密切相關(guān),隨著沖角的變化,魚(yú)體不同部位出現(xiàn)不同的壓力分布規(guī)律,隨著沖角的增大,迎流面正壓區(qū)占比由23.90%增長(zhǎng)至71.66%,背流面正壓區(qū)占比由23.90%減小至1.35%。研究結(jié)果可為虹鱒的個(gè)體和群體行為以及養(yǎng)殖水域的選擇、養(yǎng)殖技術(shù)和裝備開(kāi)發(fā)以及仿生學(xué)研究提供參考。

摘要： 合理選擇鹽度馴化方式是目前虹鱒(Oncorhynchus mykiss)養(yǎng)殖生產(chǎn)所要解決的重要問(wèn)題之一。本研究通過(guò)分析鹽度馴化對(duì)虹鱒幼魚(yú)外骨骼(鱗組織)中基因表達(dá)水平的影響,重點(diǎn)探討了鹽度對(duì)魚(yú)類骨代謝的影響機(jī)制。首先,分別采集海水(鹽度28)馴化7d和常規(guī)淡水養(yǎng)殖(對(duì)照)條件下的虹鱒鱗組織,采用Illumina HiSeq 4000測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-Seq)。以log_(2)|fold change|≥1且P<0.05作為顯著差異表達(dá)基因(DEGs)篩選條件,共篩選出1714個(gè)DEGs,其中,484個(gè)基因顯著上調(diào),1230個(gè)基因顯著下調(diào)。GO功能注釋分析結(jié)果顯示,上述DEGs主要被注釋在細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、金屬離子結(jié)合和ATP結(jié)合等功能中。KEGG通路富集分析結(jié)果顯示,DEGs在氧化磷酸化、藥物代謝–細(xì)胞色素P450、蛋白酶體、p53信號(hào)通路和心肌收縮等通路中顯著富集。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)對(duì)隨機(jī)選取的8個(gè)DEGs的表達(dá)量進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果顯示,RT-qPCR與RNA-Seq結(jié)果一致,表明RNA-Seq數(shù)據(jù)可靠。結(jié)果表明,以4/d的鹽度提升速率對(duì)虹鱒進(jìn)行鹽度馴化,對(duì)其Mmp-2、Mmp-9、Acp5b、Alpl、Osteocalcin、OPG和Col12a1等骨代謝相關(guān)基因及NF-kB、MAPK-(JNK、p38、ERK1/2和STAT3)、Wnt/β-catenin、BMP/Smads和OPG-RANK-RANKL等骨代謝相關(guān)信號(hào)通路影響不顯著,說(shuō)明本研究所采用的馴化模式較為合理。本研究結(jié)果可為虹鱒的養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)踐提供參考,所獲得的基因信息、功能注釋和通路富集信息可為探究硬骨魚(yú)類骨代謝的調(diào)控機(jī)理及其應(yīng)對(duì)環(huán)境變化的演化規(guī)律提供新視角。

摘要： 當(dāng)前,針對(duì)虹鱒(Oncorhynchus mykiss)疫病的防治仍主要依賴藥物,抗菌藥物的濫用導(dǎo)致微生物耐藥性及生態(tài)環(huán)境安全等問(wèn)題,環(huán)保有效的益生菌制劑已在水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)中得到廣泛應(yīng)用。盡管乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌等益生菌在虹鱒養(yǎng)殖中可明顯促進(jìn)魚(yú)體生長(zhǎng),提高消化酶活性,改變腸道菌群結(jié)構(gòu),增強(qiáng)機(jī)體免疫力,但是對(duì)益生菌的益生效果和機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)總結(jié)。本文概述了目前虹鱒養(yǎng)殖中使用益生菌的種類、補(bǔ)充方式、益生效果和益生機(jī)制,以期為虹鱒綠色可持續(xù)養(yǎng)殖提供參考。

摘要： 大鱗大麻哈魚(yú)胚胎細(xì)胞(Chinook salmon embryo cells,CHSE-214)和虹鱒性腺細(xì)胞(Rainbow trout gonad cells,RTG-2)是傳染性胰臟壞死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)檢測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)所推薦使用的鮭鱒魚(yú)源細(xì)胞系。本研究選用24株IPNV毒株,以1000倍半數(shù)組織培養(yǎng)物死亡劑量(50%tissue culture infective dose,TCID_(50))分別接種于CHSE-214和RTG-2細(xì)胞,以細(xì)胞病變情況比較這兩種細(xì)胞對(duì)IPNV的敏感性。將IPNV以10 TCID_(50)和100 TCID_(50)接種在篩選出的最敏感細(xì)胞系上,每天觀察細(xì)胞的病變及變化,收獲病毒培養(yǎng)物。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-q PCR)及病毒滴度測(cè)定法分析IPNV在敏感細(xì)胞上的增殖狀況。結(jié)果顯示,接毒后7 d時(shí),全部毒株均能在CHSE-214細(xì)胞上增殖,并導(dǎo)致細(xì)胞病變,而僅有8株IPNV能在RTG-2細(xì)胞上增殖,導(dǎo)致細(xì)胞病變,表明CHSE-214細(xì)胞對(duì)IPNV的敏感性高于RTG-2細(xì)胞。利用RT-q PCR和TCID_(50)法分析IPNV在CHSE-214上的增殖情況發(fā)現(xiàn),隨著接毒時(shí)間的增加,病毒量整體呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),接毒后3 d時(shí)達(dá)到最大值。該增殖趨勢(shì)均出現(xiàn)在不同接毒劑量組,除接毒后1 d時(shí),其余各時(shí)間點(diǎn)10 TCID_(50)劑量組的病毒量均顯著高于100 TCID_(50)劑量組(P<0.05)。本研究結(jié)果表明,CHSE-214細(xì)胞比RTG-2更適合用于IPNV的體外分離培養(yǎng),且在多數(shù)細(xì)胞出現(xiàn)典型細(xì)胞病變而尚未完全脫落時(shí)病毒含量最高,此時(shí)適合收集病毒培養(yǎng)物進(jìn)行病毒檢測(cè)。本研究可為IPNV的檢測(cè)提供科學(xué)指導(dǎo)。

摘要： 為研究納米硒對(duì)熱應(yīng)激下虹鱒血清抗氧化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響,選取平均體質(zhì)量約80 g的8月齡虹鱒600尾,隨機(jī)分為3組,其中,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,處理組分別飼喂添加了5,10 mg/kg納米硒的日糧,在虹鱒適宜生長(zhǎng)水溫(18°C)條件下飼喂9 d在24°C(虹鱒產(chǎn)生熱應(yīng)激)下熱應(yīng)激48 h;分別在熱應(yīng)激前(18°C,0,3,6,9 d)和熱應(yīng)激(24°C,4,8,12,24,48 h)每組隨機(jī)取10尾魚(yú),采集血清,測(cè)定抗氧化和免疫指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),相比對(duì)照組添加納米硒顯著提高了血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和球蛋白(GLB)含量;熱應(yīng)激下谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量降低,過(guò)氧化氫酶(CAT)和丙二醛(MDA)的含量升高,納米硒提高了GSH-Px、SOD和CAT含量,降低了MDA含量;熱應(yīng)激使對(duì)照組血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的含量逐漸升高,5 mg/kg納米硒組在熱應(yīng)激4 h相比對(duì)照組TNF-α和IL-1β的含量顯著提高,熱應(yīng)激12 h相比對(duì)照組IL-1β的含量顯著降低;免疫球蛋白M(IgM)在熱應(yīng)激4 h含量下降,熱應(yīng)激12 h含量上升,補(bǔ)體3(Complement 3,C3)的含量在熱應(yīng)激下逐漸下降,納米硒則顯著提高了IgM和C3的含量。綜上,飼糧中添加納米硒可提高熱應(yīng)激下虹鱒血清抗氧化和免疫指標(biāo),且相比10 mg/kg添加量,添加5 mg/kg納米硒對(duì)機(jī)體的保護(hù)能力更強(qiáng)。

摘要： 本研究以道氏虹鱒為研究材料,采用不同濃度氯化鈉溶液對(duì)虹鱒精子活力進(jìn)行觀察,以期找到最適合受精的離子濃度,提高虹鱒的繁育效果.通過(guò)觀察精子的快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間和壽命,研究了不同NaCl濃度的變化對(duì)3、4齡虹鱒精子的活力的影響.結(jié)果表明,隨著NaCl濃度的增加,4齡虹鱒精子激烈運(yùn)動(dòng)時(shí)間與壽命都逐漸減少,3齡虹鱒精子激烈運(yùn)動(dòng)時(shí)間與壽命都呈現(xiàn)拋物線狀分布,且NaCl濃度在0.8％時(shí)精子激烈運(yùn)動(dòng)時(shí)間與壽命都達(dá)到最長(zhǎng),分別為(25.20±3.04)s和(75.91±9.87)s.在低于0.2%濃度的氯化鈉溶液中，4齡虹鱒精子激烈運(yùn)動(dòng)時(shí)間與壽命都明顯高于3齡虹鱒精子。

摘要： 本研究以虹鱒作為研究對(duì)象,研究虹鱒在急性氨氮暴露下的呼吸強(qiáng)度和頻率、血?dú)鈪?shù)、鰓神經(jīng)上皮細(xì)胞、腦組織氨代謝等方面的變化.結(jié)果顯示，虹鱒可以快速感應(yīng)環(huán)境或血液中的氨氮水平并做出呼吸反應(yīng)。鰓神經(jīng)上皮細(xì)胞中[Ca2+]i，對(duì)氨氮存在著快速和慢速兩種形式的反應(yīng)，表明其對(duì)氨氮的感應(yīng)可能存在著多種機(jī)制。在使用MSOX抑制腦中谷氨酰胺合成酶活性后，即使暴露在清水中，虹鱒的腦氨氮濃度與呼吸作用也顯著上升，表明腦中氨氮濃度對(duì)呼吸有著直接的調(diào)節(jié)作用。綜上所述，氨氮能夠被鰓神經(jīng)上皮細(xì)胞所感受，引起腦組織中的氨代謝轉(zhuǎn)化，并刺激虹鱒的呼吸作用。

摘要： 本研究采用PCR-SSCP及克隆測(cè)序的方法,對(duì)虹鱒DAA基因第2外顯子多態(tài)性與抗IHN相關(guān)性進(jìn)行分析.結(jié)果共檢出17個(gè)等位基因，其中有13個(gè)為首次發(fā)現(xiàn)。單個(gè)個(gè)體最多存在5種等位基因，表明在虹鱒中，DAA基因至少存在三個(gè)拷貝位點(diǎn)。對(duì)17種等位基因序列分析，發(fā)現(xiàn)核苷酸多態(tài)位點(diǎn)38個(gè)，氨基酸多態(tài)位點(diǎn)21個(gè)。抗IHN相關(guān)性分析結(jié)果表明，等位基因DAA*0301;DAA*0304;DAA*1301;DAA*1701可能與IHN的抗病性相關(guān)，DAA*0306;DAA*0802;DAA*1602可能是與IHN易感性相關(guān)的等位基因。

摘要： 所謂殼寡糖,實(shí)際上是一種低聚殼聚糖(殼聚糖是甲殼素N-脫乙酰基的產(chǎn)物).與甲殼素和殼聚糖不同,殼寡糖一般都具有生物活性.醫(yī)學(xué)研究表明,殼寡糖在抑制腫瘤方面具有重要的意義.目前的報(bào)道證實(shí),甲殼素和殼聚糖可以提高魚(yú)類吞噬細(xì)胞的吞噬功能,但是作為一種低聚殼聚糖的殼寡糖是否具有相同的作用,是否能夠作為魚(yú)類免疫促進(jìn)劑,目前尚不了解.因此,本研究選擇殼寡糖作為具體的免疫促進(jìn)劑.目前,對(duì)于病毒性疾病尚無(wú)有效的治療藥物,如果能開(kāi)發(fā)出相應(yīng)的免疫促進(jìn)劑去提高虹鱒苗種的非特異性免疫功能,從而相應(yīng)地提高其抵抗病毒感染的能力,最終就能提高虹鱒苗種的存活率,減少虹鱒養(yǎng)殖者的經(jīng)濟(jì)損失.基于這一點(diǎn),本研究選擇虹鱒作為研究對(duì)象.結(jié)合殼寡糖等可以降低血清中的皮質(zhì)醇含量、而皮質(zhì)醇含量的降低有助于提高魚(yú)類的抗病力的事實(shí),我們認(rèn)為,殼寡糖在飼料中的添加量達(dá)到0.04％以及0.04％以上時(shí),具有提高虹鱒抗病力的功能.但是,這種功能的發(fā)揮受時(shí)間的影響.因此,今后有必要研究不同作用時(shí)間內(nèi)殼寡糖對(duì)虹鱒非特異性免疫功能的影響,從而為正確使用殼寡糖奠定基礎(chǔ).

摘要： 利用5個(gè)不同遺傳背景的虹鱒養(yǎng)殖群體(以A、B、C、D、E分別表示虹鱒的渤海、丹麥、道氏、挪威、加州養(yǎng)殖群體)為材料,采用單因子和多因子兩種交配策略,于2004年12月14日,建立了虹鱒不同親本的雜交系和自繁系,由20個(gè)正、反交組合與5個(gè)自繁群組成,對(duì)其生產(chǎn)性能進(jìn)行了近兩年的比較試驗(yàn).結(jié)果表明:從開(kāi)食到1+齡魚(yú)階段(2005-03～2006-10),各雜交組合成活率的平均值與渤海、丹麥、道氏、挪威和加州自繁系相比分別提高了25.21％、2.34％、7.18％、4.18％和5.92％;各雜交組合飼料系數(shù)的平均值比渤海自繁系降低了19.74％,與其他養(yǎng)殖群體相比差異不顯著(P0.05);A♀×B♂、C♀×A♂和C♀×B♂組合的生長(zhǎng)速度相對(duì)于五個(gè)自繁系分別提高了13.1％、9.2％和1.5％,且差異顯著(P＜0.05).而從11月齡到22月齡(同環(huán)境飼育階段),A♀×B♂、C♀×A♂、C♀×B♂和D♀×B♂組合相對(duì)于五個(gè)自繁系的平均生長(zhǎng)速度分別提高了9.3％、17.5％、16.7％和8.9％,差異極顯著(P＜0.01).五個(gè)群體間存在的遺傳差異是它們能夠獲得雜種優(yōu)勢(shì)和性狀得到改良的基礎(chǔ).

摘要： 實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象是低溫下虹鱒工廠化養(yǎng)殖水體氨氮處理系統(tǒng)。生物活性濾池的掛膜實(shí)驗(yàn)從2004年1月28日開(kāi)始，實(shí)驗(yàn)主要是在掛膜實(shí)驗(yàn)的后期和掛膜實(shí)驗(yàn)完成后的一段時(shí)間.內(nèi)，對(duì)生物活性濾池中微生物的數(shù)量進(jìn)行了跟蹤監(jiān)測(cè)。數(shù)據(jù)表明，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，隨著系統(tǒng)的運(yùn)行，生物活性濾池中細(xì)菌的數(shù)量在1.0 × 106～2.0×106范圍內(nèi)變化幅度不大。硝化細(xì)菌和亞硝化細(xì)菌的數(shù)量持續(xù)上升，至第13 d到達(dá)穩(wěn)定期，數(shù)量分別為4.6×103個(gè)/g和1.1×104個(gè)/g。實(shí)驗(yàn)初期，系統(tǒng)中沒(méi)有反硝化細(xì)菌;從第8天開(kāi)始，數(shù)量逐漸增加;實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，數(shù)量達(dá)到7.5×102個(gè)/g。在實(shí)驗(yàn)的第13 d，掛膜實(shí)驗(yàn)基本完成，歷程34天。在生物活性濾池的微生態(tài)系統(tǒng)中，硝化細(xì)菌、亞硝化細(xì)菌和反硝化細(xì)菌種群之間存在明顯的互生關(guān)系。同時(shí)，循環(huán)水體的氨氮、硝酸鹽和亞硝酸鹽濃度的測(cè)定結(jié)果表明，在掛膜實(shí)驗(yàn)期間，它們的濃度不斷上升，當(dāng)硝化細(xì)菌、亞硝化細(xì)菌和反硝化細(xì)菌的數(shù)量到達(dá)穩(wěn)定期后，就開(kāi)始顯著下降。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的比較也證明了生物活性濾池中的硝化—反硝化系統(tǒng)在發(fā)揮作用。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了低溫下pH下降對(duì)微生物生長(zhǎng)有較強(qiáng)的抑制作用。整個(gè)實(shí)驗(yàn)充分證明了經(jīng)過(guò)低溫環(huán)境的馴化和誘導(dǎo)，在背離微生物生長(zhǎng)最佳溫度的12°C低溫實(shí)驗(yàn)條件下，亞硝化細(xì)菌、硝化細(xì)菌和反硝化細(xì)菌所組成的硝化—反硝化系統(tǒng)仍然是工廠化養(yǎng)殖水體中氨氮處理的有效手段。實(shí)驗(yàn)結(jié)果認(rèn)證了在冷水魚(yú)工廠化養(yǎng)殖中使用生物活性濾池的可行性。

摘要： 本文對(duì)在榆中縣虹鱒魚(yú)試驗(yàn)場(chǎng)對(duì)該魚(yú)病情的分析情況作了介紹.并通過(guò)飼料分析、細(xì)菌分離培養(yǎng)、組織學(xué)檢查對(duì)虹鱒的疾病情況進(jìn)行了探討.初步認(rèn)為這是一種營(yíng)養(yǎng)性肝病和肌病.

摘要： 本文將虹鱒的兩種腫瘤壞死因子基因的蛋白編碼片段經(jīng)酶切消化后,連接到pQE30表達(dá)載體上,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌JM109中,獲得了高效表達(dá)的重組蛋白;應(yīng)用Ni-NTA和固定金屬親和層析(IMPC)技術(shù),在變性條件下獲得了高度純化的重組蛋白,離體活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該重組蛋白不僅可以激活吞噬細(xì)胞的吞噬活性,而且可以調(diào)控其他炎癥反應(yīng)因子如白介素(IL)的表達(dá),從細(xì)胞和分子水平鑒定了該重組蛋白具有相應(yīng)的生物學(xué)活性.

摘要： 經(jīng)過(guò)兩階段計(jì)63天的試驗(yàn)證明,當(dāng)飼料粗蛋白基本一致時(shí),隨著虹鱒配合飼料中油脂添加量的增加,虹鱒生長(zhǎng)速度加快,產(chǎn)量增加,餌料系數(shù)隨之降低,而魚(yú)油的養(yǎng)殖效果要優(yōu)于磷脂油,與飼料中添加9.5℅磷脂油相比,添加20℅魚(yú)油的飼料群體重量生長(zhǎng)率提高68.8℅,飼料蛋白質(zhì)效率提高81.2℅,飼料經(jīng)濟(jì)效率提高47.7℅,而餌料系數(shù)則降低了43.9℅,僅從千克魚(yú)飼料成本和生產(chǎn)應(yīng)用來(lái)看,則以飼料中添加10℅磷脂油加10℅魚(yú)油最優(yōu),千克魚(yú)成本降低31.4℅.

摘要： 為了研究虹鱒飼料中添加土豆蛋白濃縮物（ＰＰＣ）對(duì)生長(zhǎng)和飼料利用的影響，該研究設(shè)計(jì)了３個(gè)實(shí)驗(yàn)，分別探討了９．４℅～５１．０℅和２℅～１０℅兩個(gè)范圍的ＰＰＣ使用比例的影響。在約１４°C下進(jìn)行了２期生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，在第３期實(shí)驗(yàn)中測(cè)定了攝食率和消化率。所有的飼料等氮等能。結(jié)果表明，攝食ＰＰＣ飼料的虹鱒生長(zhǎng)和飼料利用效率均下降，當(dāng)全部的蛋白源為ＰＰＣ時(shí)，死邙率上升。僅在２℅的使用水平時(shí)對(duì)生長(zhǎng)和飼料利用效率無(wú)負(fù)的影響。因此，此類土豆蛋白濃縮物，尤其是使用量較高時(shí)，不適合虹鱒飼料。

摘要： 本發(fā)明涉及一種無(wú)毒性虹鱒和鱸魚(yú)剝制標(biāo)本的制作、保存和標(biāo)本個(gè)體鑒定的方法，該方法包括剝制標(biāo)本的制作過(guò)程、保存和標(biāo)本個(gè)體的鑒定。將魚(yú)固定為設(shè)計(jì)好的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，制作魚(yú)頭模型；用保鮮膜包被標(biāo)本的整個(gè)表面，向容器內(nèi)倒入調(diào)制好的石膏，待石膏固化后，將固態(tài)石膏分成多塊，取出魚(yú)標(biāo)本；將固態(tài)石膏合拼在一起，向其內(nèi)注入發(fā)泡料，制作魚(yú)標(biāo)本的形狀，取出魚(yú)模型；根據(jù)展示方式選擇魚(yú)的側(cè)面或者腹部進(jìn)行切口，剝離皮張；對(duì)魚(yú)皮進(jìn)行脫脂，將皮張放入溶有洗衣粉的水中，將表面的油脂去除，然后用酸性白土和鋸末進(jìn)行脫脂，風(fēng)干；將魚(yú)皮和魚(yú)頭模型安裝在魚(yú)模型上。本發(fā)明提供的制作虹鱒和鱸魚(yú)標(biāo)本的方法對(duì)標(biāo)本制作人員和參觀人員都無(wú)身體損害。

摘要： 本發(fā)明公開(kāi)了一種重組虹鱒I型干擾素、其原核表達(dá)和純化方法及應(yīng)用，原核表達(dá)和純化方法包括虹鱒I型干擾素基因的獲取、虹鱒I型干擾素基因的篩選、原核表達(dá)載體的構(gòu)建與篩選和重組蛋白的表達(dá)與純化等幾個(gè)步驟，制備得到的虹鱒I型干擾素具有良好的生物活性，安全、高效，能夠用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中預(yù)防病毒感染性疾病，具有良好的應(yīng)用前景。

摘要： 一種虹鱒海水馴化方法，其特征在于，在虹鱒入海養(yǎng)殖前利用人工補(bǔ)光延長(zhǎng)光照，使淡水中養(yǎng)殖的大規(guī)格魚(yú)種在生理上向耐鹽方向轉(zhuǎn)變，之后采用鹽度兩步過(guò)渡方式進(jìn)行海水馴化。由于海水養(yǎng)殖虹鱒在魚(yú)肉品質(zhì)、不占用土地、節(jié)淡水、苗種易獲得等方面的優(yōu)勢(shì)，人們開(kāi)始海水養(yǎng)殖虹鱒，但如果操作不當(dāng)，淡水中培育的大規(guī)格虹鱒魚(yú)種在馴化入海的過(guò)程中會(huì)對(duì)魚(yú)類產(chǎn)生較大傷害，甚至?xí)霈F(xiàn)大規(guī)模死亡。本方法對(duì)海水馴化的虹鱒傷害較小，操作簡(jiǎn)便。

摘要： 虹鱒atg12基因及虹鱒ATG12蛋白，涉及一種虹鱒基因及虹鱒的蛋白。本發(fā)明提供了虹鱒atg12基因序列及虹鱒ATG12蛋白，以及虹鱒ATG12蛋白多克隆抗體的制備方法。本發(fā)明中虹鱒ATG12蛋白經(jīng)原核表達(dá)獲得，為虹鱒自噬蛋白相關(guān)機(jī)制研究奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。由于冷水性魚(yú)類有效商業(yè)抗體的缺乏，使其生長(zhǎng)與發(fā)育機(jī)制的研究被限制在轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平；并且目前冷水性魚(yú)類蛋白水平的機(jī)制研究處于空白階段。本發(fā)明獲得的虹鱒自噬蛋白(ATG12蛋白)的多克隆抗體能高效并特異性地檢測(cè)虹鱒自噬蛋白的表達(dá)，為冷水性魚(yú)魚(yú)類蛋白水平的機(jī)制研究奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。

摘要： 虹鱒lc3b基因及虹鱒LC3B蛋白，它涉及一種虹鱒基因及虹鱒的蛋白。本發(fā)明提供了虹鱒lc3b基因序列及虹鱒LC3B蛋白，以及虹鱒LC3B蛋白多克隆抗體的制備方法。本發(fā)明虹鱒lc3b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1中核苷酸序列所示。本發(fā)明虹鱒LC3B蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本發(fā)明為冷水性魚(yú)類細(xì)胞自噬的研究提供了物質(zhì)基礎(chǔ)，此制備方法可滿足獲取冷水性魚(yú)類多克隆抗體的需求。

摘要： 本發(fā)明公開(kāi)了一種利用基因工程改造地衣芽孢桿菌來(lái)源的溶菌酶而得到的溶菌酶突變體，與野生型相比較，突變體的比酶活提高了0.43~1.1倍。本發(fā)明獲得的地衣芽孢桿菌溶菌酶突變體具有比酶活高、制備簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，并且在虹鱒魚(yú)保鮮領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。

摘要： 本發(fā)明提供一種虹鱒魚(yú)的工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖方法，是在避光的養(yǎng)殖環(huán)境中，使用全光譜光源照射養(yǎng)殖水體，水體表面的光強(qiáng)在100?200Lx。本發(fā)明的方法能夠有效的促進(jìn)虹鱒魚(yú)生長(zhǎng)、提高飼料利用和肌肉中脂肪含量的方法，從而提高人工養(yǎng)殖的虹鱒魚(yú)品質(zhì)；本發(fā)明的方法在不影響虹鱒魚(yú)存活、肝臟健康以及不提高飼料中脂肪含量的前提下顯著提高了在工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖模式下虹鱒魚(yú)生長(zhǎng)、飼料利用和肌肉中脂肪的含量。

摘要： 本發(fā)明公開(kāi)了一種虹鱒全雌三倍體規(guī)?；品N方法，屬于魚(yú)類性別調(diào)控和倍性育種技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明開(kāi)發(fā)了基于體色標(biāo)記的雌核發(fā)育技術(shù)，批量化創(chuàng)制全雌種質(zhì)，再通過(guò)性別控制技術(shù)批量化誘導(dǎo)全雌種質(zhì)為性逆轉(zhuǎn)雄魚(yú)(偽雄魚(yú))，通過(guò)偽雄魚(yú)與普通雌魚(yú)雜交獲得全雌受精卵，并利用壓力處理，限定了受精卵放入壓力裝置的壓力和放入時(shí)長(zhǎng)，最終達(dá)到批量化生產(chǎn)虹鱒全雌三倍體的目的。本發(fā)明有效解決了虹鱒養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的三倍體苗種供給難題，為進(jìn)口三倍體苗種國(guó)產(chǎn)化替代提供了解決方案。

摘要： 本發(fā)明公開(kāi)了一種虹鱒魚(yú)肝細(xì)胞系的建立方法，屬于魚(yú)類細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過(guò)組織塊培養(yǎng)法、酶消化法、肝細(xì)胞原代培養(yǎng)基的優(yōu)化、臺(tái)盼藍(lán)染色、CCK?8法、糖原染色、透射電鏡鑒定、虹鱒肝細(xì)胞支原體檢測(cè)這八個(gè)步驟予以實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明組織塊分離法并不適用于虹鱒魚(yú)肝細(xì)胞分離，在培養(yǎng)過(guò)程中未見(jiàn)細(xì)胞從組織塊中遷出，而胰蛋白酶消化法獲得良好穩(wěn)定的分離效果，經(jīng)0.25％胰蛋白酶消化25min，每克肝重可收集細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1.8×108個(gè)，平均細(xì)胞存活率達(dá)到95％；不同培養(yǎng)基和不同血清濃度均會(huì)影響細(xì)胞貼壁以及生長(zhǎng)，含15％FBS DMEM培養(yǎng)基生長(zhǎng)效果明顯優(yōu)于MEM、M199以及L15培養(yǎng)基。

摘要： 本發(fā)明公開(kāi)了虹鱒ccne1基因的dsRNA及其應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種虹鱒ccne1基因、干擾基因片段及其dsRNA。首先以虹鱒幼魚(yú)性腺組織總RNA為模板克隆獲得ccne1的基因序列，其核苷酸序列為SEQ ID NO.1，氨基酸序列為SEQ ID NO.2。以ccne1基因序列為模板設(shè)計(jì)干擾基因片段的引物，獲得干擾基因片段，核苷酸序列為SEQ ID NO.3，經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄合成得到虹鱒ccne1基因的dsRNA。本發(fā)明的虹鱒ccne1基因的dsRNA能夠高效沉默ccne1基因，并有效降低虹鱒體內(nèi)其他減數(shù)分裂相關(guān)基因的表達(dá)，為虹鱒減數(shù)分裂通路解析提供研究思路。