摘要： 背景:人參皂苷Rg3在腦缺血疾病中具有一定的神經(jīng)保護作用,但其對氧糖剝奪/復糖復氧損傷的PC12細胞是否也有保護作用,目前尚不明確。目的:研究人參皂苷Rg3對氧糖剝奪/復糖復氧損傷的PC12細胞是否有保護作用以及相關機制。方法:構建高分化PC12細胞的氧糖剝奪/復糖復氧損傷模型,采用MTT、乳酸脫氫酶、Calcein-AM/PI染色、Western blot、流式檢測氧糖剝奪/復糖復氧損傷后對PC12細胞的影響,以及不同濃度人參皂苷Rg3處理PC12細胞后的保護作用,并且使用PI3K/AKT通路抑制劑LY294002和AKT激活劑SC79從PI3K/AKT信號通路研究其作用機制。結果與結論:①氧糖剝奪/復糖復氧損傷模型能隨著缺糖缺氧時間的延長從而降低PC12細胞的存活率,促進細胞凋亡,上調p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白比值,促進NLRP3炎性小體、腫瘤壞死因子α、白細胞介素1β、BAX蛋白的表達,促進乳酸脫氫酶的釋放;②人參皂苷Rg3在一定濃度范圍內(nèi)能提高氧糖剝奪/復糖復氧損傷的PC12細胞存活率、減少乳酸脫氫酶的釋放,抑制細胞凋亡,降低p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白比值,下調NLRP3炎性小體、白細胞介素1β、腫瘤壞死因子α、BAX蛋白的表達,還會降低活化的caspase-9蛋白表達,促進活化的caspase-3蛋白表達;③LY294002對氧糖剝奪/復糖復氧損傷的PC12細胞的保護作用與人參皂苷Rg3相當,而SC79可以減輕人參皂苷Rg3對PC12細胞的保護效果。因此,人參皂苷Rg3可以通過抑制PI3K/AKT信號通路,抑制PI3K和AKT的磷酸化,發(fā)揮抗炎、抗凋亡的作用,減輕氧糖剝奪/復糖復氧對PC12細胞造成的損傷。

摘要： 目的:探討miR-21對食管癌細胞增殖及凋亡影響與分子機制。方法:將食管癌細胞分成miR-21-NC組、miR-21組、LY294002組、LY294002+miR-21組、對照組5組,檢測miR-21表達情況及食管癌細胞系中PI3K、Akt與p-Akt表達情況。結果:食管癌細胞系的miR-21相對表達量明顯高于正常食管上皮細胞系(P<0.05);miR-21組在miR-21相對表達量高于對照組、miR-21-NC組(P<0.05);在Eca-109細胞增殖率上,結果顯示而miR-21組的細胞增值率要遠比對照組、miR-21-NC組的指標更高,對比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);LY294002組在Eca-109細胞增值率上比對照組低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);LY294002+miR-21組在Eca-109細胞增值率上比LY294002組明顯更高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);miR-21組細胞中PI3K、p-Akt相對表達量均高于對照組,LY294002組PI3K、p-Akt相對表達量均低于對照組(P<0.05)。結論:miR-21可通過調節(jié)PI3K/Akt信號通路,促進食管癌細胞的增殖及凋亡,為食管癌靶向治療提供一定理論依據(jù)。

摘要： 目的探討微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)對腎癌細胞增殖、凋亡、侵襲的影響,并分析其調控機制。方法應用RT-qPCR檢測人正常腎小管上皮細胞株HK-2細胞、腎癌細胞株786-O中的miR-199b-3p。取腎癌細胞株786-O,分別轉染孔質粒、miR-199b-3p mimics建立miR-NC組和miR-199b-3p mimics組,分別應用CCK-8增殖實驗、克隆形成實驗、細胞流式實驗、Transwell實驗觀察各組細胞增殖、凋亡、侵襲能力。應用生物信息學方法分析miR-199b-3p可能作用的靶基因。取腎癌細胞株786-O,分別轉染孔質粒、miR-199b-3p mimics(10 nmol/L)、miR-199b-3p mimics(50 nmol/L)、成纖維細胞生長因子2(FGF2)-siRNA,建立miR-NC組、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L組、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L組、FGF2-siRNA組,應用Western blotting法檢測FGF2及PI3K/AKT信號通路關鍵分子表達蛋白。結果786-O細胞中miR-199b-3p表達低于HK-2細胞(P<0.05)。CCK-8增殖實驗、克隆形成實驗驗顯示miR-199b-3p mimics組細胞增殖能力低于miR-NC組(P均<0.05)。細胞流式實驗顯示,miR-199b-3p mimics組細胞凋亡率高于miR-NC組(P<0.05)。Transwell實驗結果顯示,miR-199b-3p mimics組786-O細胞侵襲能力低于miR-NC組(P<0.05)。TargetScan7.2軟件在線預測顯示FGF23′非編碼區(qū)與miR-199b-3p具有結合位點。Western boltting法實驗結果顯示,miR-NC組、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L組、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L組FGF2蛋白表達分別為0.87±0.11、0.42±0.06、0.23±0.04,三組兩兩比較P均<0.05。miR-199b-3p mimics組、FGF2-siRNA組細胞中FGF2、p-AKT、p-ERK蛋白表達低于miR-NC組,AKT、ERK蛋白表達高于miR-NC組(P均<0.05)。結論miR-199b-3p在腎癌細胞中低表達,可以抑制腎癌細胞增殖、侵襲并促進其凋亡,其作用機制可能與miR-199b-3p負靶向調控FGF2、PI3K/AKT信號通路有關。

摘要： 目的:探討瘦素對大鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織的神經(jīng)保護作用及其機制。方法:將40只雄性SD大鼠隨機分為假手術組、模型組、瘦素組和PI3K抑制劑組,每組10只。除假手術組外,其余3組均采用改良Longa線栓法建立大鼠大腦局灶性缺血再灌注損傷模型。對各組大鼠進行神經(jīng)功能缺損評分,采用2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法檢測腦梗死體積,蘇木素—伊紅(HE)染色法觀察皮層組織的病理形態(tài)變化,原位末端標記(TUNEL)法檢測細胞凋亡,蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測各組磷酸化蛋白酶B(p-Akt)的表達,組織免疫熒光法比較各組內(nèi)質網(wǎng)應激相關蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶12(Caspase 12)的表達。結果:與假手術組比較,模型組神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、細胞凋亡率均升高(P<0.05),CHOP和Caspase 12的熒光強度均增強;與模型組比較,瘦素組的神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、細胞凋亡率均降低(P<0.05),CHOP和Caspase 12的熒光強度均減弱,皮層組織中神經(jīng)細胞形態(tài)明顯改善,并且p-Akt蛋白水平升高(P<0.01);與瘦素組比較,PI3K抑制劑組的神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、細胞凋亡率均升高(P<0.05);CHOP和Caspase 12的熒光強度均增強。結論:瘦素可改善大鼠腦缺血再灌注后損傷,其機制可能與激活PI3K/Akt信號通路,下調內(nèi)質網(wǎng)應激相關的促凋亡因子CHOP和Caspase 12的表達有關。

摘要： 目的探討過表達miR-411對宮頸癌細胞增殖、侵襲和凋亡的影響及機制。方法以正常宮頸上皮永生化細胞End1/E6E7為對照細胞,qRT-PCR檢測宮頸癌Caski、SiHa和C-33A細胞miR-411表達。MTT法、Transwell小室及流式細胞術檢測轉染miR-411 mimics 48 h的SiHa細胞增殖、侵襲能力和凋亡率。通過雙熒光素酶報告基因實驗及miR-411 mimics/inhibitor對PIK3R3表達影響驗證miR-411和PIK3R3靶向關系。將PIK3R3 siRNA及miR-411 mimics+PIK3R3過表達載體轉染至SiHa細胞,轉染48 h,檢測細胞的增殖、侵襲能力和凋亡率。Western blotting檢測轉染miR-411 mimics 48 h的SiHa細胞PI3K、p-AKT、PCNA、E-cadherin和cleaved caspase3表達。結果miR-411在宮頸癌細胞表達明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。過表達miR-411可明顯抑制SiHa細胞增殖和侵襲能力,促進細胞凋亡(P<0.05)。miR-411可靶向負調控PIK3R3表達。抑制PIK3R3表達可明顯降低SiHa細胞增殖和侵襲能力,促進細胞凋亡(P<0.05)。過表達PIK3R3可逆轉miR-411對SiHa細胞增殖、侵襲和凋亡的影響。過表達miR-411可明顯抑制PI3K、p-AKT和PCNA表達,促進E-cadherin和cleaved caspase3表達(P<0.05)。結論miR-411可通過靶向PIK3R3抑制PI3K/AKT信號通路,從而影響宮頸癌細胞增殖、侵襲和凋亡。

摘要： 目的:運用網(wǎng)絡藥理學方法篩選黨參、海藻“藥對”治療肝癌主要化學成分,預測其作用靶點及通路。方法:借助中藥系統(tǒng)藥理分析數(shù)據(jù)庫(TCMSP)、“中國知網(wǎng)”數(shù)據(jù)庫檢索黨參、海藻“藥對”的化學成分;TCMSP、PubChem、SEA以及Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫檢索化學成分的靶點;通過TTD、人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫(OMIM)獲取肝癌的相關作用靶點;運用Cytoscape3.8.2軟件構建“黨參、海藻-活性成分-靶點-肝癌”網(wǎng)絡圖;運用STRING數(shù)據(jù)庫構建蛋白-蛋白相互作用(PPI)網(wǎng)絡圖;采用OmicsBean數(shù)據(jù)庫進行基因本體(GO)功能富集分析和京都基因與基因組百科全書(KEGG)信號通路富集分析;采用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法(MTT法)檢測巖藻甾醇對人HepG2肝癌細胞增殖的抑制作用。結果:經(jīng)數(shù)據(jù)庫分析表明,黨參的活性成分有20種、海藻6種,其中黨參抗肝癌主要化合物是木犀草素、黨參炔苷;海藻抗肝癌主要化合物是槲皮素、巖藻甾醇。黨參、海藻“藥對”化合物作用靶點共有964個,肝癌作用靶點有486個,化合物-肝癌共同作用靶點有32個,細胞表皮生長因子受體(EGFR)、蛋白激酶B(AKT1)、血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)與TP53為主要作用靶點。GO功能富集分析主要涉及細胞增殖、程序性死亡、凋亡負調控和催化等多個生物過程;胞質、細胞器和細胞核等結構;蛋白質二聚的分子功能。KEGG通路分析共得到信號通路190條,絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-AKT為最主要的信號通路。MTT檢測顯示,與空白對照組(0 mmol/L)相比,巖藻甾醇各劑量組細胞存活率明顯降低,差異均有顯著性(均P<0.05)。結論:黨參、海藻“藥對”是多靶點、多通路治療肝癌,為后續(xù)深入研究黨參、海藻“藥對”治療肝癌的作用機制奠定基礎,初步證明巖藻甾醇可以抑制人HepG2肝癌細胞的增殖。

摘要： 目的探討黃連素(berberine,BE)對HSV-1病毒感染HEp-2細胞活性影響及其相關分子機制。方法構建感染細胞模型,分為對照組、感染組、BE低濃度組(5μmol·L^(-1)-BE)、中濃度組(10μmol·L^(-1)-BE)和高濃度組(15μmol·L^(-1)-BE),培養(yǎng)24 h。qRT-PCR測定HSV-1感染相關基因(gD、ICP-4、ICP-8、ICP-27)及LncRNA NRAV、miR-299-3p、RAB5C的mRNA表達水平;CCK-8法與流式細胞術分析檢測細胞的活性與凋亡率;Western blot分析PI3K/AKT信號通路和JNK/p38 MAPK信號通路相關蛋白的表達水平。結果BE降低了gD、ICP-4、ICP-8、ICP-27的mRNA表達,提升了細胞活性,抑制了細胞凋亡,通過抑制LncRNA NRAV與RAB5C,促進miR-299-3p的表達,同時抑制了PI3K/AKT信號通路和JNK/p38 MAPK信號通路蛋白PI3K、AKT、JNK、p38的蛋白表達水平。結論BE能提升HSV-1感染后HEp-2細胞的活性,并抑制其凋亡,其機制可能與LncRNA NRAV、RAB5C靶向競爭結合miR-299-3p,抑制PI3K/AKT信號通路和JNK/p38 MAPK信號通路的激活有關。

摘要： 目的:探討桃核承氣湯含藥血清對脂多糖(LPS)誘導的主動脈內(nèi)皮細胞增殖及相關因子表達的影響。方法:將30只雄性SD大鼠隨機分為2組,正常組與含藥血清組各15只,含藥血清組用桃核承氣湯灌胃,正常組給予等劑量生理鹽水灌胃,7 d后自腹主動脈取血,離心取血清,分裝備用。用不同濃度梯度含藥血清干預細胞,CCK-8法、流式細胞儀檢測各濃度含藥血清對內(nèi)皮細胞增殖、凋亡的影響,確定10μmol/L為最佳干預濃度。將主動脈內(nèi)皮細胞分為空白對照組(10%空白血清)、空白血清組(10%含藥血清)、模型對照組(LPS+10%空白血清)、模型血清組(LPS+10%含藥血清)。Western-blotting檢測各組干預后的主動脈內(nèi)皮細胞磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、轉化生長因子(TGF-β)、假性蛋白激酶3(TRIB3)蛋白的表達。結果:與空白血清組、空白對照組相比,模型對照組的PI3K、Akt、TGF-β表達均下降,TRIB3表達含量上升,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);經(jīng)桃核承氣湯含藥血清培養(yǎng)后,與模型對照組相比,模型血清組的PI3K、Akt、TGF-β表達含量上升,TRIB3表達下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論:桃核承氣湯含藥血清可以抑制TRIB3表達,促進PI3K、Akt和TGF-β表達,桃核承氣湯含藥血清能促進損傷內(nèi)皮細胞新生,可能與PI3K/Akt信號通路有關。

摘要： 目的研究環(huán)狀RNA核受體相互作用蛋白1(circNRIP1)在肺腺癌組織中的表達及臨床意義,并探討circNRIP1對肺腺癌細胞增殖和轉移能力的影響和發(fā)揮作用的分子機制。方法采用qRT-PCR檢測circNRIP1在肺腺癌組織和癌旁組織中的表達,并分析circNRIP1的表達與肺腺癌患者臨床病理參數(shù)的關系及對肺腺癌患者預后的影響。常規(guī)培養(yǎng)肺腺癌細胞A549,轉染circNRIP1 siRNA,分為si-NC組和si-circNRIP1-1組、si-circNRIP1-2組,qRT-PCR檢測各組細胞中circNRIP1的表達,MTS檢測各組細胞增殖能力,平板克隆實驗檢測各組細胞克隆形成能力,流式細胞儀檢測各組細胞周期,Transwell實驗檢測各組細胞轉移能力;Western blotting檢測circNRIP1對PI3K/AKT信號通路關鍵蛋白表達影響。結果與癌旁組織相比,circNRIP1在肺腺癌組織中的表達顯著升高(P<0.05),circNRIP1高表達與肺腺癌腫瘤分化程度、TNM分期和淋巴結轉移顯著相關(P<0.05),高表達circNRIP1的肺腺癌患者預后較差。與si-NC組相比,si-circNRIP1-1組和si-circNRIP1-2組肺腺癌細胞中circNRIP1的表達顯著降低(P<0.05),肺腺癌細胞增殖、平板克隆形成能力和轉移能力顯著降低(P<0.05),細胞周期阻滯在G0/G1期(P<0.05)。干擾circNRIP1表達顯著抑制肺腺癌細胞PI3K/AKT信號通路關鍵蛋白pPI3K和pAKT的表達及其下游靶蛋白cyclinD1和MMP2的表達。結論circNRIP1可能通過調控PI3K/AKT信號通路促進肺腺癌細胞的增殖和轉移。

摘要： 磷脂酰激醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信號通路作為經(jīng)典的細胞信號轉導途徑,在細胞生長、增殖、分化和凋亡等多種生物學過程中發(fā)揮作用。腦出血是一種高致殘率和高致死率的腦血管疾病,該通路在腦出血發(fā)生發(fā)展中的研究也備受關注。該文以PI3K/Akt信號通路為主線,對該通路的結構及生物學特點、與腦出血之間的關系以及基于該通路探討藥物對腦出血的作用進行綜述,為臨床腦出血的治療提供新的思路。

摘要： 本發(fā)明涉及基于SREBP?1/PI3K/AKT信號通路調控乳腺癌增殖遷移的抑制劑及其應用，所述抑制劑為短肽，所述短肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本發(fā)明的抑制劑可以采用現(xiàn)有短肽合成技術生成，成本低，但是效果好，安全性高，選擇性高。

摘要： 本發(fā)明公開了一種IL?11單克隆抗體在抑制P13K/Akt信號通路中的應用，IL?11單克隆抗體的濃度為8ug/mL；IL?11單克隆抗體的用量為10ug。本發(fā)明尋找到了一種安全有效的P13K/Akt信號通路抑制劑(IL?11單克隆抗體)，該抑制劑能特異性的結合細胞分泌的IL?11，誘導PTEN的轉錄，上調PTEN的表達，抑制P13K/Akt信號通路下游的AKT的表達，達到抑制整條信號通路的作用。該抑制劑是天然抗體，因而減少毒副作用，安全有效。

摘要： 本發(fā)明涉及關于PRCP的拮抗劑、PREP的拮抗劑、或者PRCP以及PREP的雙重拮抗劑的藥物組合物。本發(fā)明也涉及關于聯(lián)合使用PRCP的拮抗劑和mTOR的拮抗劑、聯(lián)合使用PREP的拮抗劑和mTOR的拮抗劑、或者聯(lián)合使用PRCP以及PREP的雙重拮抗劑和mTOR的拮抗劑的藥物組合物。此外，本發(fā)明還涉及治療或預防癌癥等與PI3K/AKT/mTOR信號通路相關的疾病的方法。

摘要： 本發(fā)明首次公開了一種18F標記的8?乙氧基?2?(4?氟苯基)?3?硝基?2H?色烯(S14161)及其制備方法，所述制備合成方法具有以下優(yōu)勢：制備原料廉價易得，合成工藝簡單，反應條件溫和，放射化學合成時間快捷；所得產(chǎn)物提純分離簡單方便，所得產(chǎn)物放射化學純度超過98％，同時產(chǎn)物放射化學產(chǎn)率高，不校正產(chǎn)率高達92％，藥物的放射性比活度高；所得產(chǎn)物具有用于腫瘤的檢查診斷和腫瘤的放射治療的價值。18F標記的8?乙氧基?2?(4?氟苯基)?3?硝基?2H?色烯其結構式如下所示：

摘要： METTL3抑制劑在制備抑制PI3K/Akt和ERK1/2信號通路的藥物中的應用，本發(fā)明屬于細胞內(nèi)信號通路技術領域，是要解決現(xiàn)有PI3K/Akt和ERK1/2信號通路抑制劑存在副作用的問題。METTL3抑制劑在制備抑制PI3K/Akt和ERK1/2信號通路的藥物中的應用。敲低METTL3能夠抑制結腸癌細胞增殖，能夠抑制結腸癌細胞侵襲、遷移和克隆形成，能夠抑制EphA2和VEGFA的表達，抑制血管擬態(tài)的形成。本發(fā)明應用于結腸癌靶向藥物的篩選領域。

摘要： 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥工程技術領域，具體涉及PI3K/ATK信號通路激活劑在制備預防或治療心臟疾病藥物的用途、藥物組合物。本發(fā)明設計實驗驗證miRNA?130a?3p可部分通過激活PI3K/AKT信號通路，促進細胞自噬，抑制細胞凋亡，提高細胞活性，減輕LPS誘導的炎癥性心肌細胞損傷。表明miRNA?130a?3p可以作為炎癥性細胞損傷的治療靶點，miRNA?130a?3p、miRNA?130a?3p模擬物、促進miRNA?130a?3p表達的活性成分可以作為PI3K/ATK信號通路激活劑，通過激活PI3K/ATK信號通路，減輕炎癥性心肌細胞損傷，能夠應用于治療伴隨有炎癥性心肌損傷的心臟疾病。

摘要： 本發(fā)明涉及基于SREBP?1/PI3K/AKT信號通路調控乳腺癌增殖遷移的抑制劑及其應用，所述抑制劑為短肽，所述短肽具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本發(fā)明的抑制劑可以采用現(xiàn)有短肽合成技術生成，成本低，但是效果好，安全性高，選擇性高。

摘要： 長鏈非編碼RNA在增生性瘢痕中抑制PI3K/AKT信號通路中的應用，包括以下步驟：檢測增生性瘢痕和瘢痕旁正常皮膚組織以及其來源的原代成纖維細胞中AKT蛋白的磷酸化水平；不同濃度的PI3K磷酸化抑制劑LY294002處理來源于增生性瘢痕原代成纖維細胞，并檢測抑制劑LY294002對成纖維細胞的抑制率；采用鎖核苷酸（LNA）技術干擾lncRNA FPASL表達，采用慢病毒過表達lncRNA FPASL并轉染至增生性瘢痕原代成纖維細胞，并檢測lncRNA FPASL的表達；干擾和過表達lncRNA FPASL后檢測改變lncRNA FPASL后成纖維細胞p?AKT、AKT的蛋白表達水平；PI3K磷酸化抑制劑LY294002處理干擾lncRNA FPASL后的成纖維細胞后，CCK8細胞活力測定分析成纖維細胞的增殖能力。本發(fā)明為增生性瘢痕的形成機制提供了新的視角，也為其治療提供了潛在靶點。

摘要： 本發(fā)明涉及一種c?Src/PI3K信號通路在生殖損傷保護中的應用，涉及生物技術和醫(yī)學技術領域。本發(fā)明提供了一種c?Src/PI3K信號通路作為靶點在制備用于治療生殖損傷的藥物中的應用，為開發(fā)天然生精藥物提供新作用靶點。

摘要： 本發(fā)明公開左金丸對人胃癌耐藥細胞ROCK/PTEN/PI3K信號通路的調控作用及其應用。本發(fā)明通過抑制ROCK、PI3K信號對ZJW誘導胃癌耐藥細胞凋亡及周期的影響，結果顯示：ZJW可以誘導SGC7901/DDP細胞凋亡；單獨施加Y27623無明顯變化；ZJW+Y27623聯(lián)用對SGC7901/DDP細胞凋亡誘導明顯低于單用ZJW，表明ROCK信號的激活是ZJW誘導凋亡的重要因素；單用LY294002對SGC7901/DDP細胞凋亡明顯增加，表明PI3K信號是凋亡的抑制信號；聯(lián)合應用ZJW+LY294002比單用ZJW對SGC7901/DDP細胞凋亡誘導作用進一步增加，表明兩種處理方式具有協(xié)同作用。