摘要:
背景:過氧乙酸已被證明能有效滅活異體肌腱中的潛在微生物,但會使膠原分子內(nèi)、分子間交聯(lián)受到破壞,因此如何減弱或者修復(fù)這種損傷,滅菌的同時改善肌腱形態(tài)學(xué)特性是一個待解決的問題。目的:探討碳化二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺交聯(lián)是否對過氧乙酸-乙醇處理后的肌腱起保護(hù)作用。方法:選取18只新西蘭大白兔,切取半腱肌肌腱(36條)作為實(shí)驗(yàn)材料。將肌腱分3組處理,每組12條:對照組肌腱脫細(xì)胞后置入過氧乙酸-乙醇溶液中進(jìn)行滅菌處理;實(shí)驗(yàn)1組在對照組處理的基礎(chǔ)上,置入MES緩沖液中浸泡24 h,置入含50 mmol/L MES、2.5 mmol/L碳化二亞胺、5 mmol/L N-羥基琥珀酰亞胺的乙醇交聯(lián)液中浸泡6 h;實(shí)驗(yàn)2組在對照組處理的基礎(chǔ)上,置入MES緩沖液中浸泡24 h,置入含50 mmol/L MES、5 mmol/L碳化二亞胺、5 mmol/L N-羥基琥珀酰亞胺的乙醇交聯(lián)液中浸泡6 h;3組處理后均進(jìn)行伽馬輻照滅菌,分別進(jìn)行光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡與偏光顯微鏡觀察。結(jié)果與結(jié)論:①光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡:空白組膠原纖維無序性較強(qiáng),肌腱細(xì)胞散在分布,腱束間連接松散纖維間隙較寬,纖維纏繞在一起,波形紊亂;兩實(shí)驗(yàn)組肌腱平行排列且均勻規(guī)則,呈波浪形,纖維間隙小,以實(shí)驗(yàn)2組表現(xiàn)更為顯著;②透射電鏡:實(shí)驗(yàn)2組膠原原纖維直徑、膠原原纖維指數(shù)大于對照組、實(shí)驗(yàn)1組(P<0.05),實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組膠原纖維質(zhì)量平均直徑大于對照組(P<0.05),對照組膠原纖維密度大于實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組(P<0.05);③偏光顯微鏡:3組均為Ⅰ型膠原纖維占比較大、Ⅲ型膠原纖維占比較小,對照組纖維密度較小,間隙較寬松;實(shí)驗(yàn)1組纖維密度有所增加,實(shí)驗(yàn)2組纖維間隙最小、密度最為大,對照組膠原卷曲周期大于實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組(P<0.05);④結(jié)果表明,碳化二亞胺聯(lián)合N-羥基琥珀酰亞胺交聯(lián)處理能在微觀角度改善肌腱的受損程度,對過氧乙酸-乙醇處理后肌腱起保護(hù)作用,且碳化二亞胺濃度為5 mmol/L較2.5 mmol/L處理可獲得更好的肌腱形態(tài)學(xué)特征。